Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題。

（一）回答與果酒及果醋制作有關(guān)的問題：

（1）葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，菌種的來(lái)源主要是附在葡萄皮上的野生型酵母菌。要篩選得到純凈的酵母菌種，首先要配置培養(yǎng)基，配好后應(yīng)置于壓力鍋內(nèi)加熱一段時(shí)間，以達(dá)到____________目的。加熱結(jié)束后，不能立刻開鍋，否則培養(yǎng)基會(huì)____________。在固體培養(yǎng)基上劃線分離時(shí)，單菌落會(huì)出現(xiàn)在__________。在上述篩選過程中，不該出現(xiàn)的操作是____________。

（2）下圖裝置中彎曲的安全玻璃管可以讓瓶中的二氧化碳?xì)怏w排出，還可以____________。為了制作酒精含量較高（體積分?jǐn)?shù)約為15%）、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量____________。

（3）果醋發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇含量逐漸下降，這是由于醋桿菌在____________和酸性環(huán)境下將乙醉氧化為醋酸。

（二）基因敲除是針對(duì)某個(gè)序列己知但功能未知的基因，改變其基因結(jié)構(gòu)，令該基因功能喪失，從而對(duì)生物體造成影響，進(jìn)而推測(cè)出該基因功能的一門技術(shù)。以下是制備APOE 基因敲除小鼠的常規(guī)過程：

備注：neo基因是抗新霉素的抗藥基因；APOE是指載脂蛋白E，參與脂蛋白的代謝與轉(zhuǎn)化。

請(qǐng)回答：

（1）為了獲得APOE基因，可以用____________或者PCR擴(kuò)增。過程②中所需的工具酶有__________。Nco基因除了破壞APOE基因外，還具存的作用最可能是____________。

（2）培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞時(shí)，首先要在培養(yǎng)皿底部制備飼養(yǎng)層，用于飼養(yǎng)層的細(xì)胞—般是__________。經(jīng)過⑥克降以后的細(xì)胞的后裔細(xì)胞辟稱為純系，細(xì)胞純系的特點(diǎn)是____________，從而便于研究。

（3）純合的APOE基因敲除小鼠____________（能/不能）表達(dá)APOE，與正常小鼠相比表現(xiàn)出 ____________性狀。

Answer 1

【答案】 滅菌 溢出（噴出） 劃線的末端 C 減少氧氣和雜菌進(jìn)入 蔗糖 有氧（充氧） 化學(xué)方法合成 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 作為標(biāo)記基因，便于篩選 胚胎成纖維細(xì)胞 遺傳性狀均一，表現(xiàn)的性狀相似 不能 脂蛋白的代謝和轉(zhuǎn)化異常

【解析】本題綜合考查果酒和果醋的制作、微生物接種操作、基因工程及其應(yīng)用、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等知識(shí)，要求考生能利用所學(xué)知識(shí)解讀題干和圖形信息，進(jìn)行分析、推理和判斷，進(jìn)而回答相關(guān)問題，此題綜合性較強(qiáng)，但難度一般。

（一）（1）葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，菌種的來(lái)源主要是附在葡萄皮上的野生型酵母菌。要篩選得到純凈的酵母菌種，首先要配置培養(yǎng)基，配好后應(yīng)置于壓力鍋內(nèi)加熱一段時(shí)間，以達(dá)到滅菌目的。加熱結(jié)束后，不能立刻開鍋，否則培養(yǎng)基會(huì)溢出（噴出）。在固體培養(yǎng)基上劃線分離時(shí)，單菌落會(huì)出現(xiàn)在劃線的末端。在上述篩選過程中，不該出現(xiàn)的操作是C，即不能手持培養(yǎng)皿直接用酒精燈火焰給培養(yǎng)皿加熱。

（2）圖示裝置中彎曲的安全玻璃管可以讓瓶中的二氧化碳?xì)怏w排出，還可以減少氧氣和雜菌進(jìn)入，有利于酵母菌無(wú)氧呼吸。為了制作酒精含量較高（體積分?jǐn)?shù)約為15%）、糖含量也較高的葡萄酒，可以向果汁中加入適量蔗糖。

（3）果醋發(fā)酵過程中，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇含量逐漸下降，這是由于醋桿菌在有氧（充氧）和酸性環(huán)境下將乙醉氧化為醋酸。

（二）（1）為了獲得APOE基因（目的基因），可以用化學(xué)方法合成或者PCR擴(kuò)增。過程②是形成重組質(zhì)粒的過程，該過程中所需的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。Nco基因除了破壞APOE基因外，還具存的作用最可能是作為標(biāo)記基因，便于篩選出能在含新霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞。

（2）培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞時(shí)，首先要在培養(yǎng)皿底部制備飼養(yǎng)層，用于飼養(yǎng)層的細(xì)胞—般是胚胎成纖維細(xì)胞。經(jīng)過⑥克降以后的細(xì)胞的后裔細(xì)胞群稱為純系，細(xì)胞純系的特點(diǎn)是遺傳性狀均一，表現(xiàn)的性狀相似，從而便于研究。

（3）純合的APOE基因敲除小鼠由于APOE基因結(jié)構(gòu)被破壞，因而不能表達(dá)APOE，由于APOE參與脂蛋白的代謝與轉(zhuǎn)化，因此與正常小鼠相比APOE基因敲除小鼠會(huì)表現(xiàn)出脂蛋白的代謝和轉(zhuǎn)化異常性狀。