【題目】某校生物興趣小組進(jìn)行探究“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”實驗,用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)酵母菌數(shù)量。血細(xì)胞計數(shù)板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻璃制品,樣品滴在計數(shù)室內(nèi)。計數(shù)室由25個中格、每個中格由16個小格、總共400個小格組成,每個計數(shù)室容納液體的總體積為0.1 mm3。請分析并回答問題:

(1)在吸取酵母菌培養(yǎng)液前應(yīng)先將培養(yǎng)瓶______,滴加培養(yǎng)液時應(yīng)先______,再滴加培養(yǎng)液。

(2)制片時,某同學(xué)進(jìn)行了如下圖所示的操作,他統(tǒng)計出來的酵母菌數(shù)值比實際值______(選填“偏大”、“偏小”或“基本不變”)。

(3)若對培養(yǎng)液中酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的,故通常采用______法進(jìn)行計數(shù),圖1是計數(shù)室中一個中格的酵母菌分布示意圖(●代表酵母菌),該中格內(nèi)酵母菌數(shù)量應(yīng)計為______個。

(4)現(xiàn)觀察到圖2中所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)有酵母菌40個,則1 mL酵母菌培養(yǎng)液樣品中菌體數(shù)最接近______個。幾天后,由于酵母菌大量繁殖,每次計數(shù)前,需要對酵母菌樣液進(jìn)行______處理,以方便計數(shù)。

(5)研究結(jié)果表明,酵母菌種群數(shù)量變化在一段時間內(nèi)呈______型曲線增長。

【答案】振蕩蓋蓋玻片偏大抽樣檢測62×106稀釋S

【解析】

1、滴加培養(yǎng)液時應(yīng)先蓋蓋玻片,再滴加培養(yǎng)液。

2、酵母菌個數(shù)計算:

16×25型的計數(shù)公式為:

酵母細(xì)胞個數(shù)/1mL=100個小方格細(xì)胞總數(shù)/ 100 ×100×10000×稀釋倍數(shù)

25×16型的計數(shù)公式為:

酵母細(xì)胞個數(shù)/1mL =80個小方格細(xì)胞總數(shù)/ 80 ×100×10000×稀釋倍數(shù)

(1)吸取培養(yǎng)液前應(yīng)將培養(yǎng)瓶輕輕振蕩,使酵母菌均勻分布。滴加培養(yǎng)液時應(yīng)先蓋蓋玻片,再滴加培養(yǎng)液。這樣可以盡可能保證計數(shù)室被培養(yǎng)液充滿,以減少誤差。

(2)圖中是先滴加菌液,再加蓋玻片,容易使菌液沾到計數(shù)平臺兩側(cè)的支持柱表面,在支持柱表面形成一層水膜而使蓋片不能完全落在支持柱上。蓋玻片由于液滴的表面張力作用而未能嚴(yán)密的蓋到計數(shù)板表面上,使計數(shù)室內(nèi)的體積增大,計數(shù)結(jié)果將偏高。

(3)培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量比較多,逐個計數(shù)是非常困難的,通常采用抽樣檢測法進(jìn)行計數(shù)。鏡檢計數(shù)方法:①方格內(nèi)細(xì)胞的計數(shù)順序為左上右上右下左下。②壓在方格線上的細(xì)胞只計左線和上線上的細(xì)胞數(shù)。③細(xì)胞若有粘連,要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個細(xì)胞。④出芽酵母的芽體體積若超過細(xì)胞體積的1/2,則算出獨(dú)立個體。⑤計數(shù)總數(shù)不少于300個細(xì)胞。壓在方格線上左線和上線的細(xì)胞數(shù)各1個,方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)是4,因此該中格內(nèi)酵母菌數(shù)量應(yīng)計為6個。

(4)1 mL=1cm3=1000 mm3,1 mL酵母菌培養(yǎng)液樣品中菌體數(shù)約為:(1000 mm3/0.1 mm3) ×25×(40/5)=2×106。幾天后,由于酵母菌大量繁殖,可能粘連在一起,為了方便計數(shù),每次計數(shù)前,需要對酵母菌樣液進(jìn)行稀釋。

(5)由于資源和空間有限, 酵母菌呈“S”型曲線增長。

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