Question

【題目】2019年非洲豬瘟導(dǎo)致大量生豬死亡，造成重大經(jīng)濟(jì)損失，為了盡快恢復(fù)生豬養(yǎng)殖，加快豬仔的供應(yīng)，采用了圖示現(xiàn)代生物技術(shù)，為防止早期胚胎細(xì)胞異常凋亡，導(dǎo)入細(xì)胞調(diào)亡抑制基因Bcl-2，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）①過(guò)程需要對(duì)母豬注射____________激素，②過(guò)程體外受精前需要對(duì)精子進(jìn)行____________處理，卵母細(xì)胞需要發(fā)育到____________期，才具備與精子受精的能力。⑤過(guò)程將獲得的早期胚胎移植到經(jīng)過(guò)____________處理的受體母豬子宮內(nèi)。

（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得Bcl-2基因時(shí)，在第____________次循環(huán)結(jié)束后即可出現(xiàn)兩條鏈等長(zhǎng)的目的基因片段。④過(guò)程需要用到限制酶和DNA連接酶，兩種酶作用的化學(xué)鍵____________（填“相同”或“不相同”）。

（3）基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用____________法。用____________做探針，檢測(cè)Bcl-2基因在受精卵中是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。

Answer 1

【答案】促性腺 獲能 減數(shù)第二次分裂中 同期發(fā)情 3 相同 顯微注射 放射性同位素標(biāo)記的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段

【解析】

圖示為利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因豬仔的過(guò)程，其中①過(guò)程為卵母細(xì)胞和精子的采集，②過(guò)程為體外受精過(guò)程，③為載體，④過(guò)程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，⑤過(guò)程為胚胎移植，⑥過(guò)程為妊娠過(guò)程。

（1）①過(guò)程包括卵母細(xì)胞的采集，需要對(duì)母豬注射促性腺激素，使其排出更多的卵子；②過(guò)程體外受精前需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，即利用培養(yǎng)法或化學(xué)誘導(dǎo)法使其獲得受精能力，卵母細(xì)胞需要發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期才具備與精子受精的能力。⑤過(guò)程將獲得的早期胚胎移植到經(jīng)過(guò)同期發(fā)情處理的受體母豬子宮內(nèi)。

（2）根據(jù)DNA的半保留復(fù)制，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得Bcl-2基因時(shí)，在第3次循環(huán)結(jié)束后即可出現(xiàn)兩條鏈等長(zhǎng)的目的基因片段。④過(guò)程構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到限制酶和DNA連接酶，二者都作用于磷酸二酯鍵。

（3）基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用顯微注射法，檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)采用分子雜交技術(shù)，可用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段做探針，檢測(cè)Bcl-2基因在受精卵中是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。