Question

【題目】某研究小組以陳醋發(fā)酵菌種為研究對(duì)象，分離篩選出具有耐乙酸特性的乳酸菌。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問題。

（1）實(shí)驗(yàn)前需要對(duì)實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃儀器一般采用的滅菌方法是___________。

（2）取發(fā)酵菌種加入無菌緩沖液至不同稀釋度，分別涂布于乙酸濃度為4%的固體培養(yǎng)基進(jìn)行首輪篩選，該過程的接種方法稱為____________，固體培養(yǎng)基常用的凝固劑是____________。

（3）首輪篩選獲得6種菌株后，將各菌株分別接種于含4%乙酸的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)8天，培養(yǎng)基應(yīng)設(shè)置________（富氧/厭氧）條件。培養(yǎng)結(jié)束后比較各菌株產(chǎn)乳酸性能，結(jié)果如圖1所示。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)

①6株菌中產(chǎn)乳酸性能最好的是_____________。

②JN500905和JN500908不產(chǎn)乳酸，請(qǐng)分析這兩種菌首輪被篩選出來的原因_____________。

（4）將篩選出的菌株進(jìn)行培養(yǎng)，其生長曲線如圖2所示。該菌株在7天后數(shù)量不再增加，請(qǐng)從培養(yǎng)條件的角度寫出可能的原因：________________________________（寫出兩種原因）。

Answer 1

【答案】干熱滅菌 稀釋涂布平板法 瓊脂 厭氧 JN500903 這兩種菌不產(chǎn)乳酸但耐乙酸，因此能夠在含乙酸的培養(yǎng)基中存活并大量繁殖形成菌落 營養(yǎng)物質(zhì)被消耗、有害代謝產(chǎn)物積累、理化條件改變等

【解析】

通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。微生物接種的常用方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃儀器一般采用干熱滅菌的方法滅菌。

（2）將不同稀釋度的發(fā)酵液用涂布器涂布在固體培養(yǎng)基上的接種方法屬于稀釋涂布平板法。固體培養(yǎng)基常用的凝固劑是瓊脂。

（3）乳酸菌為厭氧菌，故接種菌體的培養(yǎng)基應(yīng)在厭氧環(huán)境下培養(yǎng)。

①由圖1柱形圖高度可知，6株菌中產(chǎn)乳酸性能最好的是JN500903。

②首輪篩選的培養(yǎng)基含有4%的乙酸，凡是耐乙酸的菌體均可在上述培養(yǎng)基上生長，之所以首輪篩選時(shí)JN500905和JN500908能存活，是因?yàn)槎�者雖不產(chǎn)乳酸，但耐乙酸，因此能夠在含乙酸的培養(yǎng)基中存活并大量繁殖形成菌落。

③微生物在培養(yǎng)過程中隨著營養(yǎng)物質(zhì)被消耗、有害代謝產(chǎn)物積累、理化條件改變等不利于菌體繁殖的條件出現(xiàn)，會(huì)使菌體的繁殖被抑制，所以該菌株在7天后數(shù)量不再增加。