Question

【題目】白細胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細胞介素的基因?qū)�入到酵母菌細胞中，使其分泌出有活性的白細胞介素�?/span>

（1）為增加白細胞介素基因的數(shù)量，可使用___________________技術(shù)，但前提是必須知道該基因的部

分核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成_________________。

（2）為便于鑒別受體細胞中是否含有外源基因，攜帶外源基因的質(zhì)粒上應(yīng)有___________，還應(yīng)有____________________，以利于外源基因的表達。

（3）在重組載體導(dǎo)入酵母菌細胞之前，需用_____________處理酵母菌細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為_________。在表達過程中，啟動子需與____________________識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程。

（4）為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母菌細胞作為受體細胞，可能原因是_____________________。

Answer 1

【答案】 PCR 設(shè)計引物 標記基因 啟動子和終止子 Ca2+ 轉(zhuǎn)化 RNA聚合酶 細菌細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器

【解析】試題分析：分析題圖，圖示表示基因表達載體的構(gòu)建過程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。

（1）基因工程中，常用PCR技術(shù)擴增目的基因，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設(shè)計引物。

（2）基因表達載體上的標記基因可以用于是否導(dǎo)入目的基因的檢測；此外還應(yīng)該有啟動子和終止子，以便外源基因的表達。

（3）在重組載體導(dǎo)入酵母菌細胞之前，需用Ca2+處理酵母菌，使酵母菌稱為感受態(tài)細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化。在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程。

（4）由于細菌屬于原核生物，細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器，因此為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而應(yīng)該使用酵母細胞作為受體細胞。