【題目】CTB是霍亂弧菌產(chǎn)生的腸毒素(蛋白質(zhì))結(jié)構(gòu)的一部分,可用作針對(duì)霍亂弧菌的疫苗.研究人員提取了控制CTB合成的基因(ctb),構(gòu)建基因表達(dá)載體(如圖所示),將其導(dǎo)入番茄,然后用轉(zhuǎn)基因番茄飼喂試驗(yàn)小鼠,檢測(cè)疫苗的有效性.請(qǐng)回答相關(guān)問題:
(1)為了在短時(shí)間內(nèi)獲得大量基因,可以采用技術(shù).與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)的解旋過程相比,該技術(shù)的DNA解鏈過程有何不同?(寫出一點(diǎn)即可.)
(2)使用兩種限制酶切割載體可防止切開的載體的兩個(gè)末端重新連接起來,原因是 .
(3)可采用方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)人番茄細(xì)胞,然后在加入了的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選,之后還需用方法檢測(cè)ctb基因是否整合到番茄染色體的DNA上.
(4)提取轉(zhuǎn)基因番茄不同部位的蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)只有果實(shí)中含有CTB.ctb基因只能在果實(shí)細(xì)胞中表達(dá),這與基因表達(dá)載體中的有關(guān).
(5)用轉(zhuǎn)基因番茄果實(shí)飼喂試驗(yàn)小鼠,若能在小鼠的血清中檢測(cè)到 , 則說明該轉(zhuǎn)基因疫苗是有效的.
【答案】
(1)PCR;不需要解旋酶
(2)兩種限制酶切割載體可以產(chǎn)生不同的末端
(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;卡那霉素;DNA分子雜交
(4)E8啟動(dòng)子
(5)CTB抗體
【解析】解:(1)PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因;與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)的解旋過程相比,該技術(shù)的DNA解鏈過程不需要解旋酶,通過高溫變性來實(shí)現(xiàn)解旋.(2)兩種限制酶切割載體可以產(chǎn)生不同的末端,因此使用兩種限制酶切割載體可防止切開的載體的兩個(gè)末端重新連接起來.(3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;由圖可知,標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此在加入卡那霉素的培養(yǎng)基中進(jìn)行初步篩選;檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞常用DNA分子雜交技術(shù).(4)ctb基因只能在果實(shí)細(xì)胞中表達(dá),這與基因表達(dá)載體中的E8啟動(dòng)子有關(guān).(5)轉(zhuǎn)基因疫苗若是有效的,則會(huì)表達(dá)產(chǎn)生CTB,CTB能引起機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,即CTB抗體. 故答案為:(1)PCR 不需要解旋酶(2)兩種限制酶切割載體可以產(chǎn)生不同的末端(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 卡那霉素 DNA分子雜交(4)E8啟動(dòng)子 (5)CTB抗體
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成.(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等.(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法.(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等.
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】甲、乙兩支潔凈的試管,分別注入3mL淀粉糊,然后在甲試管中注入2mL新鮮的小麥淀粉酶濾液,在乙試管中注入2mL清水。振蕩兩支試管,將其下半部浸在35℃左右的溫水中,約5min,然后同時(shí)取出兩試管,分別滴入1滴碘液。如圖所示,請(qǐng)回答:
(1)兩試管中的現(xiàn)象是:甲_____________________;乙__________________。
(2)該實(shí)驗(yàn)證明了酶的____________作用,酶之所以具有這樣的作用是因?yàn)?/span>___________。
(3)實(shí)驗(yàn)過程為什么要恒溫35℃?________________。
(4)幾位同學(xué)在探索pH對(duì)α-淀粉酶活性的影響時(shí),設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案如下。其中操作順序最合理的是(_______)
①在三個(gè)試管中各加入可溶性淀粉溶液2mL
②在三個(gè)試管中各加入新鮮的α-淀粉酶溶液1mL
③置于適宜溫度下保溫5min
④分別置于100℃、60℃、0℃環(huán)境中保溫5min
⑤加入斐林試劑后,水浴加熱,觀察現(xiàn)象
⑥將試管中溶液的pH分別調(diào)到3、7、11,保持5min
A.①④②③⑤ B.①⑥④②⑤ C.①②⑥③⑤ D.②⑥①③⑤
(5)與無機(jī)催化劑相比,酶具有的特性是:_________;_________;______。
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】一雜合植物(Ee)自交時(shí),E對(duì)e完全顯性,含有e基因的花粉有50%的死亡率,則自交后代的表現(xiàn)型比例是
A. 2:1 B. 3:1 C. 5:1 D. 1:1
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】為了研究?jī)蓚(gè)小麥新品種P1、P2的光合作用特性,研究人員分別測(cè)定了新品種與原種(對(duì)照)葉片的凈光合速率,結(jié)果如圖所示.以下說法錯(cuò)誤的是( 。
A.實(shí)驗(yàn)過程中光照強(qiáng)度和CO2初始濃度必須一致
B.可用單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入葉綠體的CO2量表示凈光合速率
C.每組實(shí)驗(yàn)應(yīng)重復(fù)多次,所得數(shù)據(jù)取平均值
D.三個(gè)品種達(dá)到最大凈光合速率時(shí)的溫度沒有顯著差異
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下圖是在透明的容器B中放入濕潤(rùn)的種子來驗(yàn)證呼吸作用產(chǎn)生二氧化碳的實(shí)驗(yàn)裝置。以下說法中錯(cuò)誤的是
A. 該裝置一定要放在黑暗的環(huán)境中,避免光下光合作用的干擾
B. 設(shè)置A裝置的目的是為了除去空氣中的C02,確保實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性
C. 溫度會(huì)影響呼吸作用的強(qiáng)度,所以要在適宜的溫度條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
D. C瓶中澄清石灰水變渾濁,是種子進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生了C02的緣故
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】圖1表示物質(zhì)擴(kuò)散的圖解,圖2是設(shè)計(jì)證明圖1物質(zhì)擴(kuò)散成立的實(shí)驗(yàn)裝置,下列有關(guān)敘述中正確的是( )
A.圖甲中水柱a將持續(xù)上升
B.圖甲中水柱a將先上升后下降
C.圖乙中水柱b將持續(xù)上升
D.圖乙中水柱b將先上升后下降
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列甲圖為真核細(xì)胞呼吸作用示意圖,乙圖為線粒體結(jié)構(gòu)模式圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)甲圖中X和D代表的物質(zhì)分別是___________、___________,X產(chǎn)生場(chǎng)所是____________。
(2)甲圖A、C過程中產(chǎn)生能量最多的是第______階段,此階段發(fā)生的場(chǎng)所對(duì)應(yīng)于乙圖中的_____(填序號(hào))。
(3)酵母菌在氧氣充足條件下的細(xì)胞呼吸反應(yīng)式為______________________________。
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列有關(guān)細(xì)胞核的說法正確的是
A.核仁與細(xì)胞中含量最多的有機(jī)化合物的合成有關(guān)
B.DNA分子可以穿過核膜進(jìn)人細(xì)胞質(zhì)
C.所有的細(xì)胞都只有一個(gè)細(xì)胞核
D.因?yàn)榧?xì)胞核是遺傳信息庫,而細(xì)茵無細(xì)胞核,所以細(xì)菌無遺傳信息
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