【題目】Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞?蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖:
請回答:
(1)步驟①中,核移植技術需要把供體細胞核和去除______的MⅡ中期卵母細胞構建成重組細胞,重組細胞經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)再發(fā)育成重組胚胎。
(2)ES細胞(胚胎干細胞)來源于早期胚胎和____,它在形態(tài)上的特性是____;在功能上的特性是_____。
(3)步驟③中,需要構建含有Rag2基因的表達載體。獲取目的基因時,可以利用___技術擴增Rag2基因片段,該技術的前提是根據(jù)Rag2基因的______設計引物。
若果要用HindⅢ和Pst I限制酶分別在含Rag2基因的DNA片段兩側進行酶切獲得Rag2基因片段,為將該片段和載體連接,所選擇的載體上也應具有的酶切位點的限制酶種類是_____。
(4)為檢測Rag2基因的表達情況,可提取治療后小鼠骨髓細胞中的________,用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。
【答案】細胞核 原始性腺 體積小、細胞核大、核仁明顯 具有發(fā)育的全能性,即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞 PCR 核苷酸序列 Hind Ⅲ和PstⅠ限制酶 蛋白質(zhì)
【解析】
本題中涉及到細胞核移植和基因工程和干細胞培養(yǎng)等技術手段,通過圖中方法進行基因治療小鼠沒有免疫排斥現(xiàn)象。
(1)細胞核移植的過程是將體細胞核移植到去細胞核的發(fā)育到MⅡ中期卵母細胞中。
(2)胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞,來源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的內(nèi)細胞團)。胚胎干細胞在形態(tài)上的特性是體積小、細胞核大、核仁明顯 ,功能上的特性是具有發(fā)育的全能性,即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞 。
(3)擴增目的基因用PCR技術可以短時間內(nèi)獲得大量目的基因,在擴增前需要提前根據(jù)已知的Rag2基因的核苷酸序列設計引物。為了使目的基因和載體能連接,目的基因和載體需要用相同的限制酶切割,切出相同的黏性末端便于連接,Rag2基因是利用限制酶HindⅢ和PstⅠ切割獲得的,因此選擇的載體上也應具有的酶切位點的限制酶種類是Hind Ⅲ和PstⅠ限制酶。
(4)檢測基因是否表達用抗原-抗體雜交法,可提取治療后小鼠骨髓細胞中的蛋白質(zhì),用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。
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【題目】一對正常的夫婦生了一個紅綠色盲的孩子,在妻子的一個初級卵母細胞中,正常情況下色盲基因的數(shù)目和分布情況最可能是
A. 2個,位于X染色體上的兩條姐妹染色單體中
B. 2個,位于X染色體上的一個DNA分子的兩條鏈中
C. 1個,位于X染色體上的一條染色單體中
D. 4個,位于四分體的每條染色單體中
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【題目】日前微博傳言手機屏幕比馬桶按鈕單位面積上的細菌多,為辨別真?zhèn)危瑑呻娨暸_利用微生物培養(yǎng)技術進行實驗,過程及結果如下。下列敘述錯誤的是
A. 本實驗采用稀釋涂布平板法接種
B. 本實驗不需要設置對照組實驗
C. 本實驗使用的培養(yǎng)基應含有水、碳源、氮源和無機鹽
D. 兩個報道結果不同,可能是因為取樣環(huán)境不同
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【題目】下丘腦在人體生理調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮著重要作用。請據(jù)圖回答問題(甲、乙、丙、丁為人體內(nèi)某種結構或細胞,A、B、C、D為調(diào)節(jié)物質(zhì)):
(1)圖中下丘腦參與的生理調(diào)節(jié)方式有______________________,當人體處于寒冷環(huán)境中,圖中物質(zhì)____________(填字母)在血液中的含量明顯升高。
(2)圖中物質(zhì)B和C依次是_________和__________;如果圖中丙部位受損,會使人患糖尿病。
(3)在血糖濃度調(diào)節(jié)過程中,圖中可表現(xiàn)為協(xié)同作用的物質(zhì)是_________(填字母)。
(4)血液中物質(zhì)A的含量過高時,抑制下丘腦和甲的分泌活動的調(diào)節(jié)方式稱為_________。
(5)下丘腦除參與圖示調(diào)節(jié)過程外,還能分泌_________________,由甲釋放到血液中,調(diào)節(jié)人體內(nèi)水的平衡。
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【題目】常溫下,向10mL0.1mol·L-1NaOH 溶液中逐滴加入0.1mol·L-1 醋酸溶液,所得滴定曲線如圖所示。下列說法正確的是( )
A. pH =7時,所加醋酸溶液的體積為10mL
B. pH<7時,溶液中c(CH3COO-)>c(Na+)
C. 7<pH<13時,溶液中一定存在:c(Na+)>c(CH3COO-)>c(OH-)>c(H+)
D. 繼續(xù)滴加0.1mol·L-1醋酸溶液,溶液pH可以變?yōu)?/span>1
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【題目】下圖表示利用大腸桿菌探究DNA復制方式的實驗,下列敘述正確的是
A. 可用噬菌體代替大腸桿菌進行上述實驗
B. 可用(NH4)235SO4、(NH4)232SO4分別代替15NH4Cl、14NH4Cl進行上述實驗
C. 試管③中b帶的DNA的兩條鏈均含有14N
D. 僅比較試管②和③的結果不能證明DNA復制為半保留復制
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【題目】下圖表示單克隆抗體的制備過程。請回答下列問題:
(1)過程①注射特定的抗原的目的是________________________________________。
(2)過程②誘導融合運用的原理是__________________,該過程中區(qū)別于植物原生質(zhì)體融合的方法是用____________處理。
(3)過程③是雜交瘤細胞的培養(yǎng),在體外培養(yǎng)時培養(yǎng)基中需要提供一定濃度的CO2,目的是_________________________。雜交瘤細胞需要經(jīng)過兩次篩選,第二次篩選的目的是________________________________________。
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【題目】如圖表示某DNA片段,下列敘述中,不正確的是( )
A.②③④構成了DNA的基本組成單位
B.DNA分子中特定的脫氧核苷酸序列代表了遺傳信息
C.⑤代表磷酸二酯鍵
D.雙鏈DNA分子中A+C=T+G
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