Question

【題目】科研人員利用胚胎干細(xì)胞對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療， 其技術(shù)流程如圖。 請回答：

⑴ 過程①獲得重組胚胎之前需要通過______技術(shù)獲得重組細(xì)胞， 接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于時期， 并用微型吸管吸出______。

⑵ 步驟②中， 重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時， 可從其______分離出 ES 細(xì)胞， ES 細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞核______ 、明顯， 在功能上具有______。

⑶ 步驟③中， 需要構(gòu)建含干擾素基因的______， 構(gòu)建之前可以利用______技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。

⑷ 步驟③中將基因?qū)��?ES 細(xì)胞的方法通常是______法， 為了檢測 ES 細(xì)胞的 DNA 上是否插入了干擾素基因， 可采用______技術(shù)。 在正常的小鼠體內(nèi)， 干擾素是在______(填一種細(xì)胞器)上合成的。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 細(xì)胞核 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 大 核仁 發(fā)育的全能性 （基因）表達(dá)載體 PCR 顯微注射 DNA分子雜交 核糖體

【解析】本題結(jié)合圖形考查胚胎工程和基因工程，要求考生理解相關(guān)知識的要點(diǎn)，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能利用所學(xué)知識解讀圖形，判斷出圖中①是細(xì)胞核移植、②是早期胚胎培養(yǎng)、③是目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，可據(jù)此分析答題。

⑴ 分析圖形可知，圖中過程①是體細(xì)胞核移植，在獲得重組胚胎之前需要通過核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MⅡ時期，并用微型吸管吸出細(xì)胞核。

⑵ 步驟②是早期胚胎培養(yǎng)， 重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時， 可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞；ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞核大、核仁明顯， 在功能上具有發(fā)育的全能性。

⑶ 步驟③是目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程， 需要構(gòu)建含干擾素基因的（基因）表達(dá)載體， 構(gòu)建之前可以利用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。

⑷ 步驟③中將基因?qū)��?ES 細(xì)胞的方法通常是顯微注射法，為了檢測ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因， 可采用DNA分子雜交技術(shù)，若檢測出雜交帶，則說明ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因。干擾素的成分是一種含少量糖類的蛋白質(zhì)，在正常的小鼠體內(nèi)，干擾素是在核糖體上合成的。