A.光照強(qiáng)度為0klx時(shí)，菠菜葉片細(xì)胞只有線粒體產(chǎn)生ATP

B.光照強(qiáng)度為4klx時(shí)，菠菜的葉片細(xì)胞開始進(jìn)行光合作用

C.光照強(qiáng)度由8-12klx的瞬間，菠菜葉綠體中C5含量升高

D.光照強(qiáng)度為18klx時(shí)，光合速率一定會(huì)隨溫度提高而上升

（1）EcoR V 酶切位點(diǎn)為，EcoR V 酶切出來(lái)的線性載體 P1 為__________未端。

（2）用 Taq DNA 聚合酶進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺 嘌呤脫氧核苷酸。載體 P1 用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為___________ 的 脫氧核苷酸，形成 P2；P2 和目的基因片段在__________酶作用下，形成重組質(zhì) 粒 P3。

（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒 P3 的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到 A、B、C 三類菌落，其生長(zhǎng)情況如下表（“+”代表生長(zhǎng)，“﹣”代表不生長(zhǎng)）。根據(jù)表 中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是_____（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、___________________。

（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 PCR 鑒定。圖 2 所示為甲、乙、丙 3 條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR 鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是____________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一 菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了 400 bp 片段，原因是_______________。

某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因連接在GFP基因的5′末端，獲得了L1-GFP融合基因（簡(jiǎn)稱為甲），并將其插入質(zhì)粒P0，構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1，其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下，圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。

回答下列問題：

（1）據(jù)圖推斷，該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí)，使用了兩種限制酶，這兩種酶是______。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證 ______，也是為了保證______。

（2）將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后，若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光，則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了_____和______過(guò)程。

（3）為了獲得含有甲的牛，該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括：將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_____移入牛的______中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。

（4）為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中，某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的______（填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”）作為PCR模板。

（1） 在適宜的條件下，提取水綿具有生理活性的完整葉綠體。

（2） 將提取的完整葉綠體放在_______中，讓葉綠體中所有膜脹破，然后進(jìn)行______，得到上清液和沉淀物。分別置于兩只試管A和B中。

（3）在A和B中分別通入14CO2，只有____________試管中能生成含有14C的光合產(chǎn)物。

（4）若分別給A和B提供_______________和磷酸并照光，可以產(chǎn)生ATP的是_________試管。

（5）請(qǐng)給上述研究課題取一名稱。名稱是：________________。

（6）如果要提取葉綠體中的色素，需要使用的試劑是_________。常利用______法將各種色素分離開來(lái)，原理是_______________________。

（7）如果要提取各種細(xì)胞器，常利用__________________法將各種細(xì)胞器分離開來(lái)。

（1） 如圖表示梨樹的葉面積指數(shù)與相應(yīng)的物質(zhì)量之間的關(guān)系，為提高產(chǎn)量，應(yīng)選擇的葉面積指數(shù)為_________，理由是_____________________。

（2） 在“草→牲畜→沼氣池→果樹”的生態(tài)模式中，梨樹下草的作用___________________。輸入到牲畜體內(nèi)的能量的去向：_________散失；還用于禽畜自身的_________________等生命活動(dòng)，后者能量的去路_____________。

（3） 豬糞進(jìn)入沼氣池發(fā)酵后，產(chǎn)生的沼氣可作為生活能源，沼氣池中的微生物在該生態(tài)系統(tǒng)中的主要功能是__________________；沼液和沼渣再施入果園，使土壤有機(jī)質(zhì)含量明顯提高，這樣做的生態(tài)學(xué)意義有___________、______________________和提供清潔的能源等。

（4） 該模式減少了投入，增加了農(nóng)民收入，其生態(tài)學(xué)原理是____________。

A.吞噬細(xì)胞攝取抗原的過(guò)程屬于協(xié)助擴(kuò)散

B.溫度變化不會(huì)影響水通過(guò)細(xì)胞膜的速率

C.護(hù)膚品中的甘油進(jìn)入皮膚細(xì)胞的過(guò)程屬于主動(dòng)運(yùn)輸

D.神經(jīng)細(xì)胞受到刺激時(shí)Na+內(nèi)流的過(guò)程屬于被動(dòng)運(yùn)輸

（1） 由過(guò)程①獲得的A為________________________。過(guò)程②③④分別采用的是胚胎工程中的___________技術(shù)、______________技術(shù)、_______________技術(shù)。

（2）圖中去掉卵母細(xì)胞的核，目的是________________________。受體應(yīng)選用____________期卵母細(xì)胞。

（3） 體細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，所需氣體主要有O2和CO2，其中CO2的作用是____________。

（4）進(jìn)行胚胎移植時(shí)，代孕母牛對(duì)移入子宮的重組胚胎基本上不發(fā)生__________________，這為重組胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。為了提高已有胚胎的利用率，可采用____________________技術(shù)。

（5）采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無(wú)限個(gè)轉(zhuǎn)基因牛，這是因?yàn)?/span>__________________________________。

（1）利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)進(jìn)行基因編輯時(shí)，Cas9蛋白可催化_______________（化學(xué)鍵名稱）水解，剪切特定DNA片段，因此Cas9蛋白的這一功能與_______________酶相似。

（2）用于編輯不同基因的CRISPR/Cas9復(fù)合物中sgRNA堿基序列不同，因此首先要確定RuBisCo基因中的待編輯序列，根據(jù)_______________原則設(shè)計(jì)引物，通過(guò)_______________技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的基因序列，作為編碼特定sgRNA的模板。該技術(shù)所需的Taq酶特點(diǎn)是_______________，能使整個(gè)反應(yīng)體系中DNA解鏈、退火、鏈的延伸都能快速進(jìn)行。

（3）將擴(kuò)增獲得的DNA片段與_______________基因共同導(dǎo)入到質(zhì)粒載體，構(gòu)建CRISPR/Cas9表達(dá)載體，將構(gòu)建成功的表達(dá)載體通過(guò)_______________方法，導(dǎo)入大豆細(xì)胞。若檢測(cè)到受體細(xì)胞中組成RuBisCo酶的氨基酸_______________發(fā)生了符合預(yù)期的改變，則表明基因編輯成功。

（4）CRISPR/Cas9系統(tǒng)在定點(diǎn)編輯基因時(shí)仍存在一個(gè)最大的弊端，就是有很大概率會(huì)造成其他一些非目的基因序列的錯(cuò)誤剪接和編輯，請(qǐng)嘗試分析其原因_______________。

（1）若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染病毒的人體內(nèi)的______________細(xì)胞，A、B到C的過(guò)程中常用與植物細(xì)胞融合相同的手段，具體有____________誘導(dǎo)，不同的手段是______________________。

（2）單克隆抗體突出的優(yōu)點(diǎn)在于它的___________________，并能大量制備。篩選時(shí)所用的培養(yǎng)基是特定的_______________培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基需要加入特殊的成分，如____________。

（3）理論上，注射了該抗體的人群不能長(zhǎng)期對(duì)甲流感免疫，試分析原因______________。

（4） 不同種動(dòng)物的體細(xì)胞融合，相比誘變育種和雜交育種方法，具有________________等突出的優(yōu)點(diǎn)。

（5）科學(xué)工作者研究的用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”的設(shè)計(jì)是___________________。用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥的方法優(yōu)于化療的原因___________________________________。

A.血紅蛋白主要存在于血漿中，而組織液和淋巴幾乎不含有

B.植物體缺鎂會(huì)使植物的光補(bǔ)償點(diǎn)對(duì)應(yīng)的光照降低，光飽和點(diǎn)對(duì)應(yīng)的光照升高

C.雙縮脲與血紅蛋白結(jié)構(gòu)組成中都含有肽鍵

D.吲哚乙酸是一種植物激素，在植物細(xì)胞的核糖體上合成