Question

【題目】內(nèi)皮素（ET）是一種含21個氨基酸的多肽，與高血壓、糖尿病、癌癥等有著密切聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮素功能異常與內(nèi)皮素主要受體ETA有關，科研人員通過構建表達載體，實現(xiàn)了ETA基因在細胞中高效表達。其過程如下（圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為CCC＇GGG，限制酶XhoI的識別序列為C＇TCGAG）。據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中ETA基因能夠在大腸桿菌細胞內(nèi)表達的原因是____________。

（2）過程①中需要用________酶處理,過程③中，用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是____________。

（3）圖中的基因表達載體至少還缺少________，鑒定ETA基因是否導入受體細胞需要用放射性同位素或熒光分子標記的__________作探針。

（4）已知熒光顯微鏡可以通過檢測熒光的強度來判斷SNAP基因是否表達及表達量。因此，利用SNAP基因與ETA基因結合構成融合基因，目的是___________。

Answer 1

【答案】 所有生物共用一套遺傳密碼 逆轉錄 使目的基因定向連接到載體上（避免目的基因及載體的任意連接） 終止子 ETA基因 檢測ETA基因能否表達及表達量

【解析】試題分析：本題以圖文結合的形式綜合考查學生對基因工程的知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知識網(wǎng)絡。在此基礎上，結合問題情境，從題圖和題意中提取有效信息，準確判斷圖中數(shù)字所示過程，進行相關問題的解答。

(1)基因的表達是指基因控制蛋白質(zhì)的合成過程，圖中ETA基因能夠在大腸桿菌細胞內(nèi)表達的原因是所有生物共用一套遺傳密碼。

(2)過程①是以mRNA為模板合成cDNA，為逆轉錄過程，需要逆轉錄酶參與催化。過程③為目的基因的獲取，其中用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是：使目的基因定向連接到載體上（避免目的基因及載體的任意連接）。

(3)圖中重組質(zhì)粒即基因表達載體的組成包括：ETA基因（目的基因）、氨芐青霉素抗性基因（標記基因）、啟動子，因此至少還缺少終止子。鑒定ETA基因是否導入受體細胞需要用放射性同位素或熒光分子標記的ETA基因作探針。

(4) SNAP基因的表達產(chǎn)物是一種熒光蛋白，因此將SNAP基因與ETA基因結合構成融合基因，其目的是有利于檢測ETA基因能否表達及表達量。