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【題目】許多大腸桿菌的質粒上含有lacZ基因,其編碼的產物β-半乳糖苷酶在X-galIPTG存在下,可以產生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,否則菌落呈現(xiàn)白色;蚬こ讨谐@迷撛韽膶胭|粒的受體細胞中篩選出真正導入重組質粒的細胞,過程如下圖。請據(jù)圖回答:

1基因工程中,構建基因表達載體的目的是 。

2限制酶EcoR的識別序列和切點是—GAATTC—Sma的識別序列和切點是—CCCGGG—。圖中目的基因被切割下來和質粒連接之前,需在目的基因的右側連接相應的末端,連接的末端序列是 ,連接過程中需要的基本工具是 。

3轉化過程中,大腸桿菌應先用 處理,使其處于能吸收周圍DNA的狀態(tài)。

4菌落的顏色為白色的是 ,原因是 。

5菌落中的目的基因是否能表達,可采用的檢測辦法是 。

【答案】1使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后代,并表達和發(fā)揮作用

2-----TTAA DNA連接酶

3Ca2

4菌落 lacZ標記基因區(qū)插入外源基因,不能表達出β-半乳糖苷酶,故菌落為白色

5抗體雜交

【解析】

試題分析:1基因工程的核心步驟是構建基因表達載體,目的是使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,能遺傳給后代,并表達和發(fā)揮作用。

2由圖可知,目的基因的左側有限制酶EcoRI的識別序列,右側是限制酶SmaI的識別序列,而質粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質粒,用限制酶EcoRI和SmaI來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側無法與質粒連接,所以目的基因被切割下來和質粒連接之前,需在目的基因的右側連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA,連接過程中需要DNA連接酶的催化。

3將目的基因導入大腸桿菌細胞之前,應先用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于能吸收周圍DNA的感受態(tài)。

4用限制酶EcoRI切割質粒時,會破壞質粒上的lacZ'基因,但切割后的質粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復,能表達產生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以產生藍色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍色;菌落導入的是重組質粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達產生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG存在下,菌落顏色為白色。

5檢測目的基因是否表達產生蛋白質,可采用抗原一抗體雜交法。

練習冊系列答案
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【題目】下列細胞器在其生命活動過程中均可產生水的是( )

A. 核糖體和中心體 B. 葉綠體和中心體

C. 線粒體和中心體 D. 核糖體和線粒體

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【題目】根據(jù)下面的實驗裝置圖圖甲、乙和果酒的生產工藝流程簡圖圖丙回答問題:

1圖甲所示裝置可用于提取____________橘皮精油、玫瑰精油胡蘿卜素

2制作果酒時可選用圖乙的裝置。為適當提高果酒的生產速率,進氣口應____________;排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連,這樣做的原因是_____________________。

3圖丙為櫻桃果酒生產工藝流程簡圖,其中沖洗的目的是____________。櫻桃榨汁前需要除去果柄,此操作是在沖洗之____________進行的。為了提高櫻桃的出汁率,在壓榨前可加入一定量的____________酶。

4若是從混雜的微生物中分離酵母菌應使用____________培養(yǎng)基。從微生物培養(yǎng)的角度分析,櫻桃果汁能夠為酵母菌的生長提供水、無機鹽和_____________________________.

5櫻桃果酒制作是否成功,發(fā)酵后可在酸性條件下用____________溶液來鑒定。在酒精發(fā)酵旺盛時,醋酸菌_________ ___能、不能將果汁中的糖發(fā)酵成醋酸,乳酸菌________________能、不能將乳酸分解CO2 和水。

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【題目】某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體.如將其葉片進行了紅光照射光吸收測定和色素層析條帶分析(從上至下),與正常葉片相比,推測實驗結果是(

A.光吸收差異顯著,色素帶缺第2條

B.光吸收差異不顯著,色素帶缺第2條

C.光吸收差異顯著,色素帶缺第3條

D.光吸收差異不顯著,色素帶缺第3條

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【題目】下列對果蠅某基因的敘述,正確的是( )

A.在復制時,不會出現(xiàn)差錯

B.一條脫氧核苷酸鏈中,相鄰的A、T堿基均以氫鍵連接

C.全部堿基中,若C占30%,則A占20%

D.轉錄出的mRNA只能指導一條肽鏈的合成

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【題目】花椰菜易受黑腐病病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質體作為部分遺傳物質的供體與完整的花椰菜原生質體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。

據(jù)圖回答下列問題:

(1)過程①所需的酶有__________

(2)過程②后,在光學顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的__________存在,這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。

(3)原生質體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是____________________。原生質體經過再生細胞壁,進而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應剪取再生植株和__________植株的根尖,通過解離、漂洗、染色和制片等過程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較它們的__________。

(5)采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進行PCR擴增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株1--4進行PCR擴增的結果。據(jù)圖判斷,再生植株1--4中一定是雜種植株的有____________________。

(6)最后,再對雜種植株進行____________________接種實驗,可篩選出具有高抗性的雜種植株。

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【題目】下列與細胞膜功能無關的是

A信息傳遞 B能量轉換

C物質運輸 D遺傳變異

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【題目】諺語苗多欺草,草多欺苗反映的種間關系是( )

A. 競爭 B. 共生 C. 寄生 D. 捕食

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【題目】黃河三角洲是河、海、陸交互作用形成的濕地生態(tài)系統(tǒng),包括河口、淺海、灘涂、沼澤、河流等天然濕地。請回答:

1淺海濕地中各種生物共同構成一個___________。

2黃河三角洲被譽為“鳥類的國際機場”。從種群的特征來看,決定鳥類種群密度變化的直接因素包括___________________________、__________________________。

3表示濕地鳥類多樣性與植物物種多樣性的關系。試分析存在這種關系的原因:_________ _____。

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