Question

【題目】磷是植物生長的重要營養(yǎng)元素之一，我國74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤的磷肥只有5%﹣25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的難溶性磷酸鹽．為了從土壤中篩選出能夠?qū)㈦y溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)化為植物能吸收的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株，以便將其添加到有機肥中，改善植物磷元素供應．科研人員進行如下實驗：

實驗原理：固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（如圖），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（）代表微生物溶解磷的能力大�。�

實驗步驟：

步驟1取某地區(qū)土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎培養(yǎng)基A上，在適宜溫度下培養(yǎng)72h．

步驟2 在基礎培養(yǎng)基A上用接種環(huán)挑取代表性菌落再次接種，培養(yǎng)34d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優(yōu)良解磷菌株（如表）．

菌株	透明圈直徑
（D）單位：mm	菌落直徑
（d）單位：mm
甲	22.8	15.3	1.5
乙	20.7	7.7	2.7
丙	8.2	7.5	1.1

請分析回答下列問題：

（1）土壤中的磷以 形式被植物細胞吸收，吸收后可用于合成 （填出3種含磷的有機物）．

（2）實驗中所用的固體培養(yǎng)基往往是在液體培養(yǎng)基中加人凝固劑 制備的，培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個 （填“種群”、“群落”、“生態(tài)系統(tǒng)”）．

（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應該是 ，步驟1中接種方法是 ，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是 ．

（4）根據(jù)實驗結果可以確定溶解磷能力最強的菌株是 ．為了保持所得菌種的純凈，需要進行菌種的保藏．臨時保藏時，要將菌種接種到試管的 格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時可以采用 的方法．

Answer 1

【答案】（1）PO43﹣（HPO42﹣或H2PO4﹣） 核酸、磷脂、ATP、NADPH等

（2）瓊脂 種群

（3）難溶性磷酸鹽 稀釋涂布平板法 灼燒滅菌

（4）乙 固體斜面 甘油管藏

【解析】

試題分析：（1）土壤中的磷以離子形式被植物細胞吸收，磷離子的存在形式有PO43﹣（HPO42﹣或H2PO4﹣），吸收后可用于合成核酸、磷脂、ATP、NADPH等含磷的有機物．

（2）固體培養(yǎng)基往往加人瓊脂作為凝固劑．培養(yǎng)基上出現(xiàn)的單一菌落可以看做一個種群．

（3）為了篩選出所需菌株，培養(yǎng)基中唯一的磷源應該是難溶性磷酸鹽，步驟1中“制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎培養(yǎng)基A上”，由此可見接種方法是稀釋涂布平板法，步驟2中接種環(huán)的滅菌方法是灼燒滅菌．

（4）“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（）代表微生物溶解磷的能力大小”，結合表格可知，菌株乙的比值（）最大，說明菌株乙的溶解磷的能力最大．為了保持所得菌種的純凈，需要進行菌種的保藏．臨時保藏時，要將菌種接種到試管的固體斜面格養(yǎng)基上，長成菌落后放人4℃的冰箱中；長期保存時可以采用甘油管藏的方法．

故答案為：（1）PO43﹣（HPO42﹣或H2PO4﹣） 核酸、磷脂、ATP、NADPH等

（2）瓊脂 種群

（3）難溶性磷酸鹽 稀釋涂布平板法 灼燒滅菌

（4）乙 固體斜面 甘油管藏