Question

【題目】新冠病毒是RNA病毒，對其進(jìn)行檢測的方法有兩種：核酸檢測和抗原—抗體雜交檢測。下圖表示新冠病毒核酸檢測的部分流程。

（1）以病毒的RNA為模板通過①______________過程合成cDNA，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，整個過程為RT-PCR。

（2）進(jìn)行 RT-PCR需要加入的酶是______________和______________。

（3）一次病毒核酸檢測歷時需16小時，為了快速檢測可采用抗原—抗體雜交，這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。首先向小鼠體內(nèi)注射___________，從小鼠的___________（器官）中獲取已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過多次____________獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，培養(yǎng)后分離提純，從而獲得大量抗體。該抗體的優(yōu)點(diǎn)有：___________________________，請舉出兩例這種抗體在現(xiàn)實(shí)中的兩大具體應(yīng)用：______________________________。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄（反轉(zhuǎn)錄） 逆轉(zhuǎn)錄酶 Taq酶（熱穩(wěn)定性強(qiáng)的DNA聚合酶） 新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒） 脾臟（免疫器官） 篩選 特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備 作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物

【解析】

單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備，單克隆抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。

（1）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄，故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。

（2）RT-PCR是擴(kuò)增DNA的過程，因?yàn)榧尤氲哪０迨?/span>RNA，故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。

（3）若采用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行病毒檢測，需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢，故設(shè)計(jì)的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，步驟如下：①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒），目的是要獲得能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞；②從免疫小鼠的脾臟中提取B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆抗體。該抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備等優(yōu)點(diǎn)。單克隆抗體可以作為診斷試劑、用于治療疾病和運(yùn)載藥物等實(shí)際應(yīng)用。