Question

【題目】富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是利用不同微生物生命活動特點的不同，制定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其數(shù)量大大增加。下圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。請分析回答下列問題。

（1）①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是_____________________________________________。

（2）若實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”的代謝類型是______________；振蕩培養(yǎng)的另一個目的是_______________________。

（3）⑤的菌落中大部分是降解_______________微生物。設(shè)置⑥的目的是________________ 。

（4）⑤→⑥采用單細(xì)胞挑取法，將所選菌種接種到⑥的培養(yǎng)基中，在此操作過程中如何防止雜菌污染(至少寫出兩點)。_____________________________________________________

（5）若研究“目的菌”的群體生長規(guī)律，將單個菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，可采用____________的方法進(jìn)行計數(shù)。若以血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法統(tǒng)計“目的菌”的數(shù)量，以一個大方格(體積為0.1 mm3)有25個中方格的計數(shù)板為例進(jìn)行計算，設(shè)五個中方格中總菌數(shù)為B，菌液稀釋倍數(shù)為C，那么原菌液的菌群密度為____________個/mL。

（6）實驗結(jié)束時，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以免____________________；滅菌是指________________________________________。

Answer 1

【答案】 擴(kuò)大培養(yǎng)(使分解對羥基苯甲酸微生物的比例增高) 異養(yǎng)需氧型 讓目的菌充分利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì) 對羥基苯甲酸 對照作用 接種過程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開時，在酒精燈旁打開一個縫隙等等 定期取樣 50000BC 污染環(huán)境或感染操作者 用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子

【解析】試題閱讀題干和題圖可知，本題是利用微生物培養(yǎng)的知識分離高效降解對羥基苯甲酸的微生物，先分析題圖，了解分離高效降解對羥基苯甲酸的微生物的過程，然后根據(jù)問題的具體內(nèi)容梳理相關(guān)知識點分析解答。其中圖示是稀釋涂布平板法。

（1）經(jīng)過①→③的重復(fù)培養(yǎng)，目的是增大分解對羥基苯甲酸的微生物的比例。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的之一是增大培養(yǎng)液中溶解氧，對此可推測培養(yǎng)微生物的代謝類型是異養(yǎng)需氧型；目的之二是讓目的菌充分利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)。

（3）實驗培養(yǎng)的微生物主要是能降解對羥基苯甲酸的微生物，所以⑤中的菌落中大部分是降解對羥基苯甲酸微生物；⑥中沒有對羥基苯甲酸，⑦中含有對羥基苯甲酸，所以⑥是起對照作用，對照的目的是說明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物。

（4）⑤→⑥過程中，為了盡可能防止雜菌污染，可以采用接種過程在火焰旁邊進(jìn)行，接種前灼燒接種環(huán)，打開試管后試管口在酒精燈上灼燒，培養(yǎng)皿打開時，在酒精燈旁打開一個縫隙等等。

（5）若研究“目的菌”的群體生長規(guī)律，將單個菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，采用定期取樣的方法進(jìn)行計數(shù)。根據(jù)密度=總數(shù)/體積，所以原菌液的菌群密度為(B/5)×25÷0.1×1000×C=50000BC個/mL。

（6）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以免污染環(huán)境或感染操作者。滅菌是指用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。