【題目】利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物發(fā)生器生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素,需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)的表達(dá)載體,選擇合適的基因啟動(dòng)子至關(guān)重要.由于無(wú)法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列,運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難.科研人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究,終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法.請(qǐng)分析回答:

(1)培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí),需要在生長(zhǎng)激素編碼序列前插入 的啟動(dòng)子.運(yùn)用 將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞.

(2)過(guò)程③需要使用的工具酶是 ,過(guò)程④中可以根據(jù)基因編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增.

(3)研究發(fā)現(xiàn)將真核生物的蛋白質(zhì)基因?qū)肓舜竽c桿菌菌株中,能轉(zhuǎn)錄形成正常mRNA,但其所控制合成的蛋白質(zhì)卻并不具有生物活性,最可能的原因是 大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體(或大腸桿菌缺乏生物膜系統(tǒng)),不能對(duì)多肽鏈

進(jìn)行折疊、組裝與修飾

(4)由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列,其原因是

【答案】(1)乳腺蛋白基因 顯微注射法

(2)限制性核酸內(nèi)切酶

(3)大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體(或大腸桿菌缺乏生物膜系統(tǒng)),不能對(duì)多肽鏈進(jìn)行折疊、組裝與修飾

(4)基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄

【解析】

試題分析:(1)培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí),根據(jù)基因的選擇性表達(dá)原理,需要在生長(zhǎng)激素編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子,使生長(zhǎng)激素編碼序列只在乳腺組織細(xì)胞中表達(dá).構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用顯微注射技術(shù).

(2)③表示將基因表達(dá)載體中的目的基因切開(kāi),需要用限制性核酸內(nèi)切酶切割.

(3)將真核生物的蛋白質(zhì)基因?qū)肓舜竽c桿菌菌株中,能正常轉(zhuǎn)錄形成了mRNA,但其所控制合成的蛋白質(zhì)卻并不具有生物活性,原因是大腸桿菌細(xì)胞屬于原核細(xì)胞,缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體,不能對(duì)多肽鏈進(jìn)行折疊、組裝與修飾.

(4)因?yàn)榛蛑袉?dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄,所以由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列.

故答案為:(1)乳腺蛋白基因 顯微注射法

(2)限制性核酸內(nèi)切酶

(3)大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)缺乏內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體(或大腸桿菌缺乏生物膜系統(tǒng)),不能對(duì)多肽鏈進(jìn)行折疊、組裝與修飾

(4)基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄

練習(xí)冊(cè)系列答案
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3D圖細(xì)胞發(fā)生減數(shù)分裂時(shí),A與A基因分離發(fā)生在____________,A與a基因分離發(fā)生在_____________。

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