科學(xué)家將人的胰島素基因與質(zhì)粒重組后，導(dǎo)入牛的受精卵，并成功從牛奶中提取到了人胰島素。請(qǐng)根據(jù)如下操作流程回答相關(guān)問(wèn)題。（已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－G↓GATCC－ ，酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－↓GATC－）。

（1）獲取目的基因的主要途徑包括直接提取和                  。?

（2）據(jù)圖分析，在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，目的基因用                   進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用                         作為標(biāo)記基因。

（3）為了得到較多的卵細(xì)胞，可以對(duì)受體母牛注射適宜劑量                  ；利用獲能的精子進(jìn)行體外受精，經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)至               期，最后進(jìn)行            移植，最終獲得“符合要求的個(gè)體”，具體是指                                        。

（4）若希望通過(guò)轉(zhuǎn)基因牛生產(chǎn)的胰島素具有作用快、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，則需要通過(guò)   工程手段對(duì)人的胰島素基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。

（12分）科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄植株的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有Pst I 、Sma I 、Hind III 、Alul 等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（amp^r為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，I 、II 表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（l）基因工程的核心是_______________________________。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用                酶，分別對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA 片段分別為      種和      種。
（3）要篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞,應(yīng)首先選擇含                     的培養(yǎng)基中篩選番茄組織細(xì)胞。
（4）研究人員通常采用                       法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)�入番茄�?xì)胞內(nèi).
(5)基因工程操作中的第四步是目的基因的檢測(cè)與鑒定,在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)通常采用   __________   技術(shù)，。采用   __________ 方法在個(gè)體生物學(xué)水平上檢測(cè)目的基因是否表達(dá)。
(6)圖中③④分別指的是           、           ,欲獲得人工種子應(yīng)培養(yǎng)到___________階段。將II細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體所用技術(shù)的理論基礎(chǔ)是___________________________。

科學(xué)家將人的胰島素基因與質(zhì)粒重組后，導(dǎo)入牛的受精卵，并成功從牛奶中提取到了人胰島素。請(qǐng)根據(jù)如下操作流程回答相關(guān)問(wèn)題。（已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－G↓GATCC－，酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－↓GATC－）。

（1）獲取目的基因的主要途徑包括直接提取和                 。?
（2）據(jù)圖分析，在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，目的基因用                  進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用                        作為標(biāo)記基因。
（3）為了得到較多的卵細(xì)胞，可以對(duì)受體母牛注射適宜劑量                 ；利用獲能的精子進(jìn)行體外受精，經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)至              期，最后進(jìn)行           移植，最終獲得“符合要求的個(gè)體”，具體是指                                       。
（4）若希望通過(guò)轉(zhuǎn)基因牛生產(chǎn)的胰島素具有作用快、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，則需要通過(guò)  工程手段對(duì)人的胰島素基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。

（12分）科學(xué)家將魚(yú)抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄植株的耐寒能力大大提高，可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有Pst I 、Sma I 、Hind III 、Alul 等四種限制酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖（amp^r 為抗氨芐青霉素基因），其中①—④ 是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程中的相關(guān)步驟，I 、II 表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答：

（l）基因工程的核心是_______________________________。

(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實(shí)例中，應(yīng)該選用                 酶，分別對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割，切割后產(chǎn)生的DNA 片段分別為       種和       種。

（3）要篩選已導(dǎo)入含魚(yú)的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞,應(yīng)首先選擇含                      的培養(yǎng)基中篩選番茄組織細(xì)胞。

（4）研究人員通常采用                        法將魚(yú)抗凍蛋白基因?qū)�入番茄�?xì)胞內(nèi).

 (5)基因工程操作中的第四步是目的基因的檢測(cè)與鑒定, 在分子水平檢測(cè)目的基因是否翻譯形成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)通常采用   __________    技術(shù)，。采用   __________ 方法在個(gè)體生物學(xué)水平上檢測(cè)目的基因是否表達(dá)。

(6)圖中③④分別指的是            、           ,欲獲得人工種子應(yīng)培養(yǎng)到___________階段。將II細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體所用技術(shù)的理論基礎(chǔ)是___________________________。

科學(xué)家將人的胰島素基因與質(zhì)粒重組后，導(dǎo)入牛的受精卵，并成功從牛奶中提取到了人胰島素。請(qǐng)根據(jù)如下操作流程回答相關(guān)問(wèn)題。（已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－G↓GATCC－ ，酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是－↓GATC－）。

（1）獲取目的基因的主要途徑包括直接提取和                  。?

（2）據(jù)圖分析，在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，目的基因用                   進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用                         作為標(biāo)記基因。

（3）為了得到較多的卵細(xì)胞，可以對(duì)受體母牛注射適宜劑量                  ；利用獲能的精子進(jìn)行體外受精，經(jīng)過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)至               期，最后進(jìn)行            移植，最終獲得“符合要求的個(gè)體”，具體是指                                        。

（4）若希望通過(guò)轉(zhuǎn)基因牛生產(chǎn)的胰島素具有作用快、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，則需要通過(guò)   工程手段對(duì)人的胰島素基因進(jìn)行設(shè)計(jì)。