【題目】GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子.對損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營養(yǎng)和保護(hù)作用.研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體(如圖1所示),并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中,用于干細(xì)胞基因治療的研究.請回答:
(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中,使用胰蛋白酶的目的是 .
(2)構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時,需選擇圖1中的 限制酶進(jìn)行酶切.
(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接,連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有三種:單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示).為鑒定這3種連接方式,選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進(jìn)行雙酶切,并對酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析,結(jié)果如圖2所示.圖中第 泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的.
(4)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后,為了檢測GDNF基因是否成功表達(dá),可用相應(yīng)的 與提取的蛋白質(zhì)雜交.當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定的密度時,需進(jìn)行 培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞,用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實驗.
【答案】(1)使細(xì)胞分散開
(2)XhoⅠ
(3)②
(4)抗體 傳代
【解析】
試題分析:(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)時,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶作用,使細(xì)胞分散開.
(2)質(zhì)粒上有XhoⅠ識別位點,而且在啟動子之后,所以選用XhoⅠ限制酶進(jìn)行酶切.
(3)泳道①僅有一種條帶,屬于載體自連;泳道②有兩種條帶,且長度分別與質(zhì)粒和GDNF基因長度相同,為正向連接;泳道③有兩種條帶,長度與BamHⅠ酶切后結(jié)果相同,為反向連接.
(4)檢測基因是否表達(dá)采用抗原抗體雜交法.培養(yǎng)動物細(xì)胞采用動物細(xì)胞培養(yǎng)法,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度,需要進(jìn)行分瓶,進(jìn)行傳代培養(yǎng).
故答案為:(1)使細(xì)胞分散開
(2)XhoⅠ
(3)②
(4)抗體 傳代
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【題目】對燕麥胚芽鞘做如下圖所示處理:
①放在暗盒里;②在胚芽鞘尖端的下部用錫箔遮住;③在尖端橫向插入云母片;④在尖端橫向插入瓊脂片;⑤切去胚芽鞘尖端;⑥切去胚芽鞘尖端,但在切口上放一含有一定濃度長素的瓊脂小塊;⑦切去尖端,在切口上放一含有一定濃度的生長素的瓊脂小塊,放在暗盒里;⑧切去胚芽鞘尖端,放在暗盒里。都用單側(cè)光照射。
看圖請回答下列問題:
(1)有單側(cè)光照射時,仍直立生長的有 。
(2)彎向光源生長的有 。
(3)向光彎曲生長的原因是 。
(4)以上實驗說明,胚芽鞘具有 ,感受光刺激的部位在 ,向光彎曲生長的部位在 。胚芽鞘尖端能夠產(chǎn)生 ,從尖端運輸?shù)较虏,運輸?shù)姆绞绞?/span> 。
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【題目】如圖為膝反射弧結(jié)構(gòu)示意圖,下列相關(guān)敘述中錯誤的是( )
A.伸肌肌群內(nèi)既有感受器也有效應(yīng)器
B.b處注入麻醉劑后,在②處檢測不到膜電位變化
C.在c處施加剌激引起屈肌收縮不屬于反射
D.若在①處施加一個有效刺激,c處膜電位會發(fā)生內(nèi)負(fù)外正→內(nèi)正外負(fù)→內(nèi)負(fù)外正的變化
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【題目】在“觀察洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂”的實驗中,結(jié)果與原因分析不符的是
A.染色體的染色效果差可能是漂洗不充分
B.分裂期細(xì)胞所占比例小就是因取材時間不恰當(dāng)
C.視野中出現(xiàn)細(xì)胞重疊現(xiàn)象是解離不充分
D.染色體無動態(tài)變化的原因是解離時細(xì)胞死亡
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【題目】目前,精子載體法逐漸成為具有誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動物方法之一,該方法以精子作為外源基因的載體,使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精。如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。請據(jù)圖回答:
(1)精子載體法過程中外源基因能夠整合到精子的___________上是提高轉(zhuǎn)化率的關(guān)鍵,因為受精時只有精子的___________才能進(jìn)入卵細(xì)胞中。
(2)過程②采用的是________________技術(shù)。
(3)利用轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁來生產(chǎn)藥物的 反應(yīng)器是科學(xué)家用藥用蛋白基因與___________________________的啟動子等調(diào)控組件重組在一起,然后導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中,最終生長發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動物。
(4)過程③需要在_____________________________________________(至少寫出兩點)等條件下進(jìn)行。
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【題目】在研究具體的物質(zhì)X時,發(fā)現(xiàn)其跨膜運輸時與曲線②和③相符,試問:細(xì)胞膜運輸物質(zhì)X的方式是 ( )
A. 主動運輸 B. 自由擴(kuò)散
C. 胞吞和胞吐 D. 協(xié)助擴(kuò)散
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【題目】在愈傷組織形成幼苗的過程中,細(xì)胞中不會發(fā)生
A. 丙酮酸在線粒體基質(zhì)中被分解生成C02
B. 水在葉綠體基質(zhì)中被分解生成02
C. 脫氧核苷酸在細(xì)胞核中聚合成DNA
D. 氨基酸在核糖體上脫水縮合形成多肽
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【題目】下列關(guān)于動、植物細(xì)胞有絲分裂相同點的敘述,不正確的是
A.分裂間期,完成DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成
B.分裂前期,由中心粒周圍發(fā)出星射線形成紡錘體
C.分裂中期,染色體的著絲點排列在赤道板上,含染色單體
D.分裂后期,著絲點一分為二,染色體數(shù)目加倍,不含染色單體
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【題目】圖甲是H2O2酶活性受pH影響的曲線,圖乙表示在最適溫度下,pH=b時H2O2分解產(chǎn)生的O2量隨時間的變化曲線.若該酶促反應(yīng)過程中改變某一初始條件,以下敘述正確的是( )
A.溫度降低時,e點不移,d點右移
B.H2O2量增加時,e點不移,d點左移
C.pH=c時,e點為0
D.pH=a時,e點下移,d點左移
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