Question

【題目】我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗,其有效成分是乙肝表面抗原蛋白。下圖是將乙肝表面抗原基因轉(zhuǎn)移到煙草細胞內(nèi)生產(chǎn)乙肝疫苗的示意圖,請據(jù)圖回答下列問題。

（1）過程①表示 。為了使目的基因正常表達，其首端必須有 ，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。若限制酶切出了平末端，要選擇 進行連接。（填“Ecoli DNA連接酶”或“T4 DNA連接酶”）

（2）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草細胞的方法稱為 。它是利用運載體Ti質(zhì)粒中含有__________序列，可以將目的基因整合到宿主細胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草細胞后�?/span>長芽、生根的過程中采用了細胞工程的_______________技術(shù)，該技術(shù)的原理是 。

（4）檢測煙草植株細胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是 。

Answer 1

【答案】（1）基因表達載體的構(gòu)建 啟動子 T4DNA連接酶

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 T-DNA

（3）植物組織培養(yǎng) 植物細胞具有全能性 抗原—抗體雜交法

【解析】

試題分析：（1）過程①表示目的基因和Ti質(zhì)粒的結(jié)合，即基因表達載體的構(gòu)建，為了使目的基因正常表達，其首端必須有啟動子，若限制酶切出了平末端，要選擇T4DNA連接酶進行連接，Ecoli DNA連接酶只能連接黏性末端。

（2）圖中借助農(nóng)桿菌將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草細�?/span>，稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，它是利用運載體Ti質(zhì)粒中含有T-DNA序列，可以將目的基因轉(zhuǎn)移、整合到宿主細胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草細胞后�?/span>長芽、生根的過程中采用了細胞工程的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)依據(jù)的原理是植物細胞具有全能性。

（4）檢測煙草植株細胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，可采用分子水平的檢測，即抗原—抗體雜交法。