Question

【題目】（五）回答下列有關(guān)基因工程的問題。

利用大腸桿菌作為受體，可以將人生長激素基因?qū)�入其中，最后合成人生長激素（蛋白質(zhì)），從而大批量生產(chǎn)這種基因工程藥物。

【1】獲取人生長激素目的基因的方法有兩種。一是________，二是先確定目的基因在細胞DNA分子上的位置，這叫________，然后用________酶從人體細胞內(nèi)分離。

基因工程中根據(jù)需要常對運載體質(zhì)粒進行適當(dāng)?shù)母脑�。pIJ702是一種常用質(zhì)粒（5.7kb，1kb=1000對堿基），限制酶SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列，如圖14所示。

【2】以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上0.6kb（1kb=1000對堿基）的SacⅠ/SphⅠ片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8（6.7kb），由此判斷目的基因為________ kb。將目的基因和質(zhì)粒重新連接的酶是________。

圖15顯示含目的基因的DNA片段、限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的識別序列（其中箭頭所指部位為限制酶的切割位點，四種質(zhì)粒的陰影部分表示標(biāo)記基因）。

【3】據(jù)圖15分析，不適合作為目的基因載體的質(zhì)粒是________。

A. ①③ B. 全都不適合 C. ②④ D. ①④

【4】下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因技術(shù)與環(huán)境安全的敘述錯誤的是________。

A. 重組DNA的微生物在降解污染物的過程中可能會產(chǎn)生二次污染

B. 種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，對環(huán)境沒有任何負面影響

C. 植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的基因可向其他植物擴散，影響生物的多樣性

D. 轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決

Answer 1

【答案】

【1】化學(xué)方法人工合成基因定位限制酶

【2】1.6DNA連接酶

【3】C

【4】B

【解析】基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【1】獲取人生長激素目的基因的方法有兩種：一是化學(xué)方法人工合成，二是先確定目的基因在細胞DNA分子上的位置，這叫基因定位，然后用限制酶從人體細胞內(nèi)分離。

【2】pIJ702的長度為5.7kb，其中SacⅠ/SphⅠ片段的長度為0.6kb，該片段被目的基因置換后構(gòu)成的重組質(zhì)粒pZHZ8，其長度為6.7kb，由此判斷目的基因為6.7-（5.7-0.6）=1.6kb。將目的基因和質(zhì)粒重新連接的酶是DNA連接酶。

【3】限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的識別序列不同，但兩者切割產(chǎn)生的黏性末端相同，因此運載體應(yīng)該有限制酶MunⅠ或EcoRⅠ的識別序列，但該序列不應(yīng)該位于標(biāo)記基因上．因此，不適合作為目的基因載體的質(zhì)粒是②④。

【4】重組DNA的微生物在降解污染物的過程中可能會產(chǎn)生二次污染，A正確；種植抗蟲棉可以減少農(nóng)藥的使用量，減少環(huán)境污染，但轉(zhuǎn)基因植株可能會導(dǎo)致基因污染，進而影響生物多樣性，B錯誤；植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)產(chǎn)生的基因可向其他植物擴散，影響生物的多樣性，C正確；轉(zhuǎn)基因生物所帶來的環(huán)境安全問題在今后有可能得到解決，D正確。