Question

【題目】土壤中含有能將難溶性磷酸鹽轉(zhuǎn)變成植物可以吸收利用的可溶性磷的優(yōu)良解磷菌株Q。下圖1表示制備固體培養(yǎng)基過程中的某操作，圖2是科研人員從土壤中分離出菌株Q的部分過程示意圖。

請回答下列問題：

（1）圖1所示操作稱為_________，待平板冷凝后_________，以防止________。

（2）圖2所示接種方法是________。在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上菌落數(shù)分別是38、42、40，則1g土壤中的活菌數(shù)約為________個(gè)。

（3）圖3是某同學(xué)利用不同于圖2方法分離菌株Q的示意圖。下列對其操作及結(jié)果的敘述錯(cuò)誤的有________。

a．操作前用無水乙醇對雙手進(jìn)行消毒處理 b．劃線時(shí)將沾有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基

c．只有在⑤區(qū)域中才能得到所需菌落 d．整個(gè)過程需要對接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒

（4）固體培養(yǎng)基中難溶性磷酸鹽在菌株Q的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（圖4），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解難溶磷酸鹽的能力大小。下表是初步篩選出的三種優(yōu)良解磷菌株。

菌株	透明圈直徑（D）	菌落直徑（d）
M-3-01	18.8	12.3
B3-5-6	20.7	8.0
T-4-01	9.1	6.5

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析溶解難溶性磷酸鹽能力最強(qiáng)的菌株是________。該菌種分離純化后，常用________法進(jìn)行長期保存。

Answer 1

【答案】倒平板 倒置 皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基 稀釋涂布平板法 a、b、c B3-5-6 甘油管藏

【解析】

分析題意可知，“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，結(jié)合表格可知，菌株B3-5-6的比值（D/d）最大，說明菌株B3-5-6的溶解磷的能力最大。

（1）圖1所示操作稱為倒平板，待平板冷凝后倒置，以防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，帶來污染。

（2）圖2所示接種方法是稀釋涂布平板法。取1g土壤，按如圖稀釋后，在三個(gè)平板上分別接入0.1ml稀釋液后，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別是38、42、40，據(jù)此可計(jì)算出每克土樣中的活菌數(shù)為（38+42+40）/3×10×10×10×（1/0.1）×100=4.0×107個(gè)。

（3）圖3是通過平板劃線接種操作。

a、操作前用70%的酒精溶液對接種人員的雙手進(jìn)行消毒處理，不能進(jìn)行滅菌處理，a錯(cuò)誤；
b、劃線操作時(shí)將沾有菌種的接種環(huán)涂抹在培養(yǎng)基表面，b錯(cuò)誤；
c、在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落，c錯(cuò)誤；
d、在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，整個(gè)過程需要對接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒，d正確。
故選abc。

（4）根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理中“透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小”，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可以確定解磷能力最強(qiáng)的菌株是 B3-5-6。該菌種分離純化后，常用甘油管藏法進(jìn)行長期保存。