Question

【題目】某轉(zhuǎn)基因牛的生產(chǎn)技術(shù)流程如圖。請(qǐng)回答：

（1）利用過程①方法構(gòu)建的基因文庫與基因組文庫相比,最顯著的特征是不含___________。采用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增此目的基因的前提是___________，以便合成引物;擴(kuò)增過程中溫度呈周期性變化，冷卻后繼續(xù)加熱到70-75℃的目的是______________________。

（2）轉(zhuǎn)入生長激素基因的牛可通過乳腺細(xì)胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，過程②中，將目的基因與____的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，通過___________________法導(dǎo)入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________(答出2項(xiàng))技術(shù)手段獲得轉(zhuǎn)基因牛。

（3）該轉(zhuǎn)基因牛進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)人的生長激素，因而稱作___________反應(yīng)器。若該轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能的原因是______________________。

Answer 1

【答案】內(nèi)含子和啟動(dòng)子 要有一段巳知目的基因的核苷酸序列使 Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成乳腺蛋白基因顯微注射早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植乳腺生物（乳房生物）目的基因未成功導(dǎo)入（或?qū)�入的目的基因未能�?zhǔn)確表達(dá)）

【解析】

據(jù)圖分析，圖示為利用基因工程生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因牛的過程，涉及到的技術(shù)有基因工程、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；圖中過程①表示利用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因（生長激素基因）的過程，過程②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體的組成成分包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等。

（1）真核基因的結(jié)構(gòu)包括非編碼區(qū)和編碼區(qū)，編碼區(qū)包括外顯子和內(nèi)含子，非編碼區(qū)的上游含有啟動(dòng)子、下游含有終止子。利用過程①反轉(zhuǎn)錄法獲得的目的基因只有外顯子對(duì)應(yīng)的片段，因此利用該方法獲得的基因文庫與基因組文庫相比，沒有內(nèi)含子和啟動(dòng)子。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提條件是要有一段巳知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物；擴(kuò)增過程中，冷卻后繼續(xù)加熱到70-75℃的目的是使 Taq酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。

（2）根據(jù)題意分析，轉(zhuǎn)入生長激素基因的�？赏ㄟ^乳腺細(xì)胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，所以應(yīng)該將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子、終止子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，再通過顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵中，然后利用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)形成早期胚胎，再利用胚胎移植技術(shù)等獲得轉(zhuǎn)基因牛。

（3）由于可以通過轉(zhuǎn)基因牛的乳汁生產(chǎn)人的生長激素，因此轉(zhuǎn)基因�？梢苑Q作為乳腺生物反應(yīng)器；若該轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中并未含有人的生長激素，可能是因?yàn)槟康幕�因未成功�?dǎo)入，也可能是因?yàn)閷?dǎo)入的目的基因未能準(zhǔn)確表達(dá)。