Question

【題目】[生物--選修一：生物技術(shù)實(shí)踐]

從自然菌樣篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。

（1）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從____________環(huán)境采集。

（2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物生長的特定環(huán)境條件，使其數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)降解苯酚的微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇________________的培養(yǎng)基。

（3）如圖為分離純化降解苯酚細(xì)菌的部分操作步驟。請(qǐng)回答下列問題：

培養(yǎng)基常用滅菌方法是在溫度為______℃條件下，維持15-30min。①是制備培養(yǎng)基時(shí)__________中的主要操作。完成步驟④的操作，接種共需要________次的灼燒處理。劃線的某個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_______________________。

（4）培養(yǎng)一段時(shí)間后，在培養(yǎng)基表面形成多個(gè)單菌落，不同菌株降解苯酚能力有差異，需要做降解能力的性能測定，為選出降解能力強(qiáng)的菌株，具體思路是：________________________________。

（5）獲得分解能力強(qiáng)的菌種后，為了臨時(shí)保存菌種，把菌種接種在試管的___________培養(yǎng)基上，在合適溫度下培養(yǎng)，等菌落長成后，再放入4℃冰箱保藏。

Answer 1

【答案】 海灘等高鹽 以苯酚為唯一碳源 121 倒平板 6 接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始 用苯酚含量相同的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)各菌株，培養(yǎng)相同時(shí)間后測定培養(yǎng)液中苯酸含量 固體斜面

【解析】試題分析：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，無菌技術(shù)和保藏菌種等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，特別使用平板劃線法接種時(shí)，需要注意的細(xì)節(jié)很多，再結(jié)合圖中相關(guān)信息和題意，就能準(zhǔn)確答題。

（1）噬鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境采集，如高鹽海灘等。

（2）目的微生物能夠產(chǎn)生降解苯酚，說明其碳源是苯酚，篩選菌株時(shí)應(yīng)選擇以苯酚為唯一碳源的培養(yǎng)基。

（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法，該滅菌方法是在溫度為121℃條件下，維持15-30min；①是制備培養(yǎng)基時(shí)倒平板中的主要操作；平板劃線時(shí)，每次劃線前都要進(jìn)行灼燒，最后一次劃線結(jié)束也要進(jìn)行灼燒，因此完成步驟④的操作共需要6次的灼燒處理；劃線的某個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始。

（4）選出降解能力強(qiáng)的菌株的方法：用苯酚含量相同的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)各菌株，培養(yǎng)相同時(shí)間后測定培養(yǎng)液中苯酸含量。

（5）臨時(shí)保存菌種時(shí)要把菌種接種在試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適溫度下培養(yǎng)，等菌落長成后，再放入4℃冰箱保藏。