Question

【題目】如圖1為某種常用質粒的序列圖，Lac Z、Amp為兩種標記基因。若質粒和目的基因用Bam HⅠ和BglⅡ兩種限制酶切割后(徹底切割)，用DNA連接酶相連(只考慮兩個片段相連)，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功連接后的重組質粒(含目的基因)，可獲得長度不同的( )種DNA片段.

A. 1B. 2C. 3D. 4

Answer 1

【答案】D

【解析】

分析圖1，質粒中有兩個標記基因（Lac Z基因編碼的酶能使無色的X-gal變?yōu)樗{色，Ampr為氨卡青霉素抗性基因），2種限制酶（BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ）的切割位點共3個，其中BamH Ⅰ有2個切割位點且都位于標記基因——Lac Z基因之中，EcoR Ⅰ只有1個切割位點。

分析圖2，目的基因的兩端各有1個限制酶酶切位點，分別是BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ，所以要想獲得目的基因，必須同時用這兩種限制酶進行切割，同時給出了這兩種限制酶的識別序列和準確的切割位點，比較發(fā)現(xiàn)，兩種限制酶切開后露出的粘性末端的堿基序列相同。

若質粒和目的基因用Bam HⅠ和BglⅡ兩種限制酶切割后(徹底切割)，用DNA連接酶相連(只考慮兩個片段相連)，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功連接后的重組質粒(含目的基因)，BamHⅠ在標記基因Lac Z基因中剩1個切割位點，在目的基因的一端有1個BamHⅠ切位點，在外源DNA有一個EcoRⅠ切割點，切割后形成4種DNA片段。ABC錯誤，D正確。故選D。