Question

【題目】不同品牌的酸奶具有不同的口味。某研究小組利用含碳酸鈣的固體培養(yǎng)基探究甲，乙兩品牌酸奶中乳酸菌的類型是否相同(乳酸能夠溶解碳酸鈣，使培養(yǎng)基變得透明)。請(qǐng)回答下列問題:

（1）將甲、乙兩品牌酸奶中的乳酸菌純化，分別接種在含碳酸鈣的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，根據(jù)菌落周圍透明圈的大小，可確定酸奶中乳酸菌的類型。不同乳酸菌菌落透明圈大小不同的原因是_________________________________________________________

（2）家庭制作酸奶時(shí)，在純牛奶中加入少量酸奶相當(dāng)于微生物培養(yǎng)技術(shù)中的________操作。 純牛奶變成酸奶，改變了口味但含有的能量減少，原因是____________________________。

（3）為長(zhǎng)期保存純化的優(yōu)質(zhì)乳酸菌，可將菌液與________充分混勻，置于20C的冷凍箱中保存。

（4）該研究小組進(jìn)一步探究甲 品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量，實(shí)驗(yàn)操作如下圖。接種微生物的方法有很多，圖中過(guò)程①②③所示的方法為_____________用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10后，才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位:個(gè)/ml), 這里的n=______用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，同時(shí)需要做A、B、C三個(gè)平板，目的是________________________如果平板菌落數(shù)超過(guò)300，一般還需進(jìn)一步_____

Answer 1

【答案】（在相同時(shí)間內(nèi)）不同類型的乳酸菌產(chǎn)生乳酸的量不同，不同量的乳酸能夠溶解碳酸鈣量不同，形成的透明圈大小不同 接種 乳酸菌在發(fā)酵時(shí)使牛奶中的營(yíng)養(yǎng)成分發(fā)生改變，乳酸菌細(xì)胞呼吸消耗部分有機(jī)物，從而使能量減少 滅菌的甘油 稀釋涂布平板法 6 設(shè)置重復(fù)組，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠 稀釋

【解析】

本題以乳酸菌為背景，綜合考查了微生物的分離和計(jì)數(shù)的相關(guān)知識(shí)。

（1）由于乳酸菌分泌的乳酸能夠溶解碳酸鈣，使培養(yǎng)基變得透明，不同類型的乳酸菌分泌乳酸的量不同，分泌量多的產(chǎn)生的透明圈較大，而分泌量少的產(chǎn)生的透明圈則較小。因此可以根據(jù)菌落周圍透明圈的大小，確定酸奶中乳酸菌的類型。

（2）由于酸奶中含有乳酸菌，因此在純牛奶中加入少量酸奶相當(dāng)于微生物培養(yǎng)技術(shù)中的接種操作。純牛奶變成酸奶是由于乳酸菌發(fā)酵的結(jié)果，乳酸菌在發(fā)酵過(guò)程中利用牛奶中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行代謝，通過(guò)細(xì)胞呼吸消耗了牛奶中的部分有機(jī)物，因此酸奶比純牛奶中的能量減少了，在乳酸菌代謝過(guò)程中又有新物質(zhì)的生成，從而使牛奶中的口味發(fā)生了改變。

（3）微生物菌種的保藏有臨時(shí)保藏和長(zhǎng)期保藏之分，臨時(shí)保藏是把菌種接種到試管的固體培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當(dāng)菌落長(zhǎng)成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在－20℃的冷凍箱中保存。

（4）要對(duì)微生物計(jì)數(shù)可以采用活菌計(jì)數(shù)法或顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，題目所給的圖片信息是采用的活菌計(jì)數(shù)法，具體操作是通過(guò)稀釋涂布平板法完成的。由①②的操作可知這時(shí)已對(duì)酸奶樣品稀釋了100倍，②重復(fù)3次又稀釋了1000倍，從中取出0.1ml樣進(jìn)行涂布，所用到的量是原來(lái)的10－6。因此這里的n=6。用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，要至少涂布3個(gè)平板，目的是設(shè)置重復(fù)組，取平均值，使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確可靠。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)中30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，如果平板菌落數(shù)超過(guò)300，說(shuō)明稀釋倍數(shù)不夠，一般還需進(jìn)一步稀釋。