Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

(1)htPA基因與載體用________切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用____________技術(shù)。

(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要經(jīng)過________，才具備受精能力。

(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的________。

(4)若在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到__________，說明目的基因成功表達(dá)。

Answer 1

【答案】

(1)同種限制性核酸內(nèi)切酶(或同種限制酶) DNA分子雜交(或核酸探針)

(2)超數(shù)排卵 獲能(處理)

(3)顯微注射法 性別鑒定 全能性

(4)htPA(或人組織纖溶酶原激活物)

【解析】

（1）用同種限制酶切割質(zhì)粒和含有htPA基因的DNA片段可產(chǎn)生相同的黏性末端，便于構(gòu)建基因表達(dá)載體；通常采用DNA分子雜交技術(shù)來檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA。

（2）為獲得更多的卵母細(xì)胞，通常對供體母羊注射促性腺激素使其超數(shù)排卵；采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力。

（3）通常用顯微注射法將重組表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物的受精卵；為了獲得母羊，移植前需要對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定；早期胚胎細(xì)胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體。

（4）htPA基因的表達(dá)產(chǎn)物為人組織纖溶酶原激活物，若在轉(zhuǎn)基因母羊的羊乳中檢測到人組織纖溶酶原激活物，說明目的基因成功表達(dá)。