【題目】腫瘤的生長依賴于新生血管,血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是目前公認最關鍵的促血管形成因子。為研究促性腺激素釋放激素(GnRH)類似物(藥物甲)、“順鉑”(一種化療藥物乙)及其聯(lián)合作用對卵巢癌動物血管生成的影響,研究人員以卵巢癌細胞為研究對象,檢測細胞中血管內(nèi)皮生長因子的mRNA和蛋白質(zhì)的含量。

材料:3mg/L順鉑、10-7mol/LGnRH類似物、胰蛋白酶、12孔細胞培養(yǎng)板(每個孔可進行細胞培養(yǎng))、卵巢癌細胞、細胞培養(yǎng)液、C02培養(yǎng)箱

(要求與說明:不考慮加入順鉑和GnRH類似物對體積的影響;VEGF的mRNA和蛋白質(zhì)含量的具體檢測步驟不要求;實驗條件適宜)

(1)實驗思路(藥物加入設計畫在下面的12孔細胞培養(yǎng)板示意圖中即可,無需再文字說明;藥物可用甲、乙表示;藥物作用3天,每24h檢測一次,無需前測;重復實驗不要求)_______

(2)若GnRH類似物、順鉑都能抑制血管生成,且聯(lián)合作用效果更佳。請畫出藥物作用48h時血管內(nèi)皮生長因子的mRNA和蛋白質(zhì)相對含量的柱形圖。_______

(3)實驗分析:

①促性腺激素釋放激素由_______產(chǎn)生。

②如果已得到上述第(2)小題中的實驗結(jié)果,為了進一步在活體水平上驗證這兩種藥物及其聯(lián)合作用的影響,下一步你將選用身體狀況一致的_______動物,隨機均分后,分組進行藥物處理,觀察_______。

【答案】 ①取等量的卵巢癌細胞和細胞培養(yǎng)液加入到12孔板細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)②將12孔細胞培養(yǎng)板置于C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每24h取對應組細胞用胰蛋白酶處理,吸取細胞檢測其mRNA和蛋白質(zhì)的含量,并記錄③分析統(tǒng)計實驗數(shù)據(jù) 下丘腦 患卵巢癌 血管生成的長度或條數(shù)

【解析】【試題分析】

本題屬于補充完善實驗步驟類試題,要根據(jù)實驗目的確定實驗變量,審讀所提供的信息中是否準確控制了實驗變量,是否遵循對照原則、單一變量原則等。對此類問題的考查,主要是看考生是否知道實驗變量的控制及實驗原則的遵循。

(1)本實驗的目的是研究藥物甲、乙及其聯(lián)合作用對卵巢癌動物血管生成的影響,根據(jù)題意和對照實驗原則,實驗設計思路為:①取等量的卵巢癌細胞和細胞培養(yǎng)液加入到12孔板細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)。實驗處理分為四組,詳見答案。②將12孔細胞培養(yǎng)板置于C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每24h取對應組細胞用胰蛋白酶處理,吸取細胞檢測其mRNA和蛋白質(zhì)的含量,并記錄。③分析統(tǒng)計實驗數(shù)據(jù)。

(2)由題意可知,GnRH類似物、順鉑都能抑制血管生成,且聯(lián)合作用效果更佳。所以藥物作用48h時血管內(nèi)皮生長因子的mRNA和蛋白質(zhì)相對含量依次為對照組含量最高、甲、乙單獨處理組次之、甲、乙聯(lián)合作用組(甲+乙)最低,具體見答案。

(3)①促性腺激素釋放激素由下丘腦產(chǎn)生。

②為了進一步在活體水平上驗證這兩種藥物及其聯(lián)合作用的影響,下一步將選用身體狀況一致的患卵巢癌動物,隨機均分后,分組進行藥物處理,觀察血管生成的長度或條數(shù)。

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