Question

【題目】下圖為某種哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程圖�；卮鹣铝袉栴}。

（1）①處需要用_______________等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)需要O2和CO2，CO2的主要作用是______________________。

（2）卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到____________________時(shí)進(jìn)行去核。與去核卵母細(xì)胞融合的供體細(xì)胞培養(yǎng)一般不會(huì)超過10代，原因是________________________。激活受體細(xì)胞除了用電刺激的方法外，還可以用 ______________________________________。（寫一種實(shí)際方法）

（3）動(dòng)物細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植的原因是_______________________ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 維持培養(yǎng)液的pH 減數(shù)第二次分裂中期 保持細(xì)胞正常的二倍體核型 鈣離子載體（或乙醇、蛋白酶合成抑制劑等） 動(dòng)物胚胎的細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難

【解析】試題分析：據(jù)題圖科可知，圖示為轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的培育過程，該過程采用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物體核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)。

（1）貼面瓶壁的細(xì)胞需要用胰蛋白酶等處理，然后分瓶培養(yǎng)，讓細(xì)胞繼續(xù)增殖；在培養(yǎng)過程中，將成動(dòng)物細(xì)胞置于5% CO2的氣體環(huán)境中，CO2的作用是維持培養(yǎng)基（液）的pH。

（2）由于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞核的位置靠近第一極體，用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核與第一極體；細(xì)胞一般傳至10代后就不易傳下去，一般來說，細(xì)胞在傳至10至50代左右，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化，與去核卵母細(xì)胞融合的供體細(xì)胞培養(yǎng)一般不會(huì)超過10代，原因是保持細(xì)胞正常的二倍體核型 。用物理或化學(xué)方法可以激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，具體的方法有電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等。
（3）動(dòng)物胚胎的細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，因此，動(dòng)物細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植。