【題目】為了檢測高原訓練對運動員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響,需要對運動員訓練前后的血紅蛋白進行提取和分離,其步驟如下:
(1)在紅細胞的洗滌操作中,血液離心后結(jié)果如圖所示,其中血紅蛋白位于__________(填“上清液”或“沉淀物”)。洗滌紅細胞時,要用相當于紅細胞液體體積5倍的___________洗滌紅細胞3次,然后加入蒸餾水到原血液體積,再加40%的_____________,攪拌約10 min,使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(2)在樣品粗分離操作中,將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析。透析的目的是_______________。
(3)血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)___________電泳進行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,相對分子質(zhì)量___________(填“較大”或“較小”)的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。在裝填色譜柱時不得有氣泡存在,原因是_______________________。
(4)檢測結(jié)果顯示,經(jīng)過高原訓練后,運動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高,試分析其可能的原因______________________。
【答案】沉淀物 生理鹽水 甲苯 去除分子量較小的雜質(zhì) SDS—聚丙烯酰胺凝膠 較大 氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂,降低分離效果 高原環(huán)境空氣稀薄,氧氣含量低,血紅蛋白含量會增加
【解析】
根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有:(1)樣品處理:①紅細胞的洗滌(低速短時間離心),②血紅蛋白的釋放(需要加入蒸餾水和甲苯),③分離血紅蛋白(中速長時間離心)。(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析。(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法(分配色譜法):①原理:分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。②凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過程:混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子。洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。④作用:分離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。
(1)血紅蛋白在紅細胞內(nèi),而血液離心后的各種血細胞主要存在于沉淀物中,因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細胞時,生理鹽水可以保持紅細胞不破裂,而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白,得到更純的紅細胞。加入蒸餾水,紅細胞吸水破裂,加入40%的甲苯,溶解紅細胞膜,最終使紅細胞破裂,釋放出血紅蛋白。
(2)透析袋能使小分子自由進出,而大分子則保留在袋內(nèi),因此透析可以去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。
(3)血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。因此,研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會在色譜柱內(nèi)部形成無效的空隙,使本該進入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂洗脫液的流動次序,影響分離的效果,因此在裝填色譜柱時不得有氣泡存在。
(4)高原空氣稀薄,氧氣含量低,為了利用更多的氧氣進行有氧呼吸,運動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高。
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】如圖為寒冷刺激下甲狀腺激素分泌的調(diào)節(jié)示意圖。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是( )
A.下丘腦中有感受寒冷刺激的感受器
B.圖中M促進甲狀腺激素分泌的過程屬于反饋調(diào)節(jié)
C.甲狀腺激素作用的靶細胞包括下丘腦細胞和垂體細胞
D.炎熱刺激下,甲狀腺激素對下丘腦和垂體起正反饋調(diào)節(jié)
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】圖中A、B代表人體內(nèi)的物質(zhì),①②③④代表體液。下列說法錯誤的是:
A. 若組織細胞為胰島細胞,則饑餓時①比④處胰高血糖素濃度低
B. 若組織細胞為腦細胞,則①比④處CO2濃度高
C. 若組織細胞為骨骼肌細胞,則B可代表乳酸
D. 若組織細胞為垂體細胞,則A可代表促甲狀腺激素釋放激素
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】如圖為某動物細胞內(nèi)部分蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運的示意圖,據(jù)圖分析下列有關(guān)敘述錯誤的是( )
A.高爾基體對其加工的蛋白質(zhì)先進行加工分類再轉(zhuǎn)運至細胞的不同部位
B.消化酶、抗體的形成需經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工
C.分泌蛋白的合成與分泌需要細胞中多種結(jié)構(gòu)的相互協(xié)調(diào)配合
D.附著核糖體合成的多肽通過囊泡運輸?shù)絻?nèi)質(zhì)網(wǎng)加工
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】為利用某種病毒的減毒株(MV)治療胰腺癌,科研人員進行了相關(guān)研究。
(1)細胞生命活動過程中產(chǎn)生衰老、受損的細胞器或功能喪失的蛋白復(fù)合物時,B蛋白在細胞內(nèi)招募L-II蛋白(由細胞質(zhì)基質(zhì)中的L-I蛋白轉(zhuǎn)變而來)等蛋白,啟動自噬過程,形成自噬體,自噬體最終融入_____中降解,這有利于保持細胞結(jié)構(gòu)和功能的_____。
(2)科研人員用MV、CQ (自噬抑制劑)和RAPA(自噬誘導劑)處理胰腺癌細胞,96 h后 測定細胞內(nèi)B蛋白、L-II蛋白、L-I蛋白含量,并以細胞內(nèi)恒定表達的p-actin蛋白含量作為參照,得到下表所示結(jié)果。
組別 | 變量控制 | 電泳結(jié)果 | L-II蛋白/ L-I蛋白 | 細胞存活率(%) | |||
MV | CQ | RAPA | B蛋白 | P-actin | |||
1 | - | - | - | 1.54 | 100 | ||
2 | - | - | + | 1.51 | 121.13 | ||
3 | - | + | - | 10.12 | 36.17 | ||
4 | + | - | - | 9.58 | 48.89 |
①本實驗中,作為對照組的是_____組。
②L-II蛋白是定位在自噬體膜上的蛋白,在自噬過程結(jié)束時會重新轉(zhuǎn)變成l- I蛋白, 因而“L-II蛋白/L-I蛋白”可作為_____的一個觀測指標。
③比較1、2、3組結(jié)果,推測自噬過程_____(選填“促進”或“抑制”)癌細胞增殖,從物質(zhì)與能量的角度分析,其原因是_____。
(3)綜合上述研究,請寫出MV影響胰腺癌細胞增殖的機制:_____。MV雖有抗胰腺癌的應(yīng)用前景,但目前研究結(jié)果在很多方面尚不足以支持臨床醫(yī)學應(yīng)用,請闡述理由:_____。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】葡萄酒是葡萄果汁經(jīng)酵母菌發(fā)酵而成的,圖甲為釀制葡萄酒的實驗裝置,在其他條件相同且適宜的情況下,測得一段時間內(nèi)裝置中相關(guān)物質(zhì)含量的變化如曲線乙所示,下列敘述不正確的是( 。
A.為避免雜菌污染,葡萄汁需高壓蒸汽滅菌
B.圖乙中曲線①表示裝置甲中O2濃度的變化
C.圖乙中曲線②表示裝置甲中酒精濃度的變化
D.用裝置甲發(fā)酵時,需定時打開閥b釋放CO2
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】果蠅體內(nèi)的一個細胞在分裂過程中,一段時期內(nèi)某種物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的數(shù)量變化如圖所示。下列敘述正確的是( )
A.若縱軸代表染色體組數(shù)且a=2,則該細胞正在進行減數(shù)分裂
B.若縱軸代表核DNA分子數(shù)且a=4,則該細胞正在進行有絲分裂
C.若縱軸代表染色體數(shù)且a=4,則該細胞在CD段不能形成四分體
D.若縱軸代表染色單體數(shù)且a=8,則該細胞在CD段可發(fā)生基因重組
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】在常染色體上的A、B、C三個基因分別對a,b,c完全顯性。用隱性個體與顯性純合個體雜交得F1,F1測交結(jié)果為Aabbcc:Aabbcc:aaBbcc:aabbCc=1:1:1:1,則下列能正確表示F1基因型的是( )
A.B.C.D.
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下圖表示某湖泊中鯽魚種群增長速率的變化情況,下列相關(guān)敘述不合理的是
A. t3時該湖泊中鯽魚種群的密度大約是t2時的一半
B. 與a點相比,b點時更適合對該鯽魚種群進行捕撈
C. 出生率、死亡率、遷入率、遷出率都是直接影響種群數(shù)量變化的因素
D. t1~t3時間段內(nèi),鯽魚種群數(shù)量在不斷增加
查看答案和解析>>
湖北省互聯(lián)網(wǎng)違法和不良信息舉報平臺 | 網(wǎng)上有害信息舉報專區(qū) | 電信詐騙舉報專區(qū) | 涉歷史虛無主義有害信息舉報專區(qū) | 涉企侵權(quán)舉報專區(qū)
違法和不良信息舉報電話:027-86699610 舉報郵箱:58377363@163.com