Question

【題目】圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過(guò)程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。

（1）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成 色。

（2）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105 的土壤樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。

該過(guò)程采取的接種方法是 ，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 ×108

個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較 。

（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為 ，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含 個(gè)氨基酸。

Answer 1

【答案】（1）尿素 酚紅 紅 （2）稀釋涂布平板法 1.75 少 （3）UGA 115

【解析】（1）由于篩選產(chǎn)脲酶，脲酶能夠催化尿素分解為氨，故應(yīng)以尿素為唯一氮源，培養(yǎng)基中可以加入酚紅指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色。

（2）用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)接種方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù)，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為（156+178+191）/3÷0.1×105=1.75×108。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí)，往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落，故用此方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)偏低。

（3）突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為UGA,由于增加70個(gè)堿基，mRNA中堿基總數(shù)（由于終止密碼子不編碼氨基酸，故除去終止密碼子含3個(gè)堿基）=271+2+72=345，由于mRNA上一個(gè)密碼子含三個(gè)堿基決定一個(gè)氨基酸，故突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含345÷3=115個(gè)氨基酸。