【題目】為研究肝癌致病機理,科研工作者利用下圖所示的差異雜交法和基因工程獲取相關(guān)癌基因以作進一步研究。請據(jù)圖回答問題:
(1)圖 1 中,A 過程需要用___________ 酶,D 過程需要回收___________ (填“未雜交”或“雜交分子”)的含 32P 的 cDNA 單鏈,繼而通過人工合成,獲得___________, 并用其構(gòu)建基因文庫。
(2)分子生物學(xué)檢測是基因工程成功與否的重要一環(huán),其中檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一 步是檢測_________________________ ,若檢測目的基因是否成功表達,則需用_______________ 方 法,該方法的原理是_____________________。
(3)上圖 2 為改造后的目的基因。圖 3 為兩種質(zhì)粒,其中 Ampr 為氨芐青霉素抗性基因,Tetr 為四環(huán)素抗性基因,lacZ 為藍色顯色基因,其表達產(chǎn)物可使底物 X-Gal 呈藍色。EcoRⅠ(0.7Kb)、NotⅠ(1.2Kb)等為限制酶及其切割位點與復(fù)制原點之間的距離(1kb=1000 個堿基對)。
①圖 3 中能作為載體的最理想的質(zhì)粒是___________(填“X”或“Y”),用選定的質(zhì)粒與圖 2 的目的基因構(gòu)建基因表達載體時,應(yīng)選用的限制酶是___________。
②若用 EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段,其長度分別為 1.7kb、5.3kb、______________________。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶 未雜交 雙鏈cDNA 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA 抗原-抗體雜交 抗原與抗體的特異性結(jié)合 X NotⅠ 3.1kb和3.9kb
【解析】
1、基因工程技術(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。
(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。
(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
(1)據(jù)圖可知圖1為構(gòu)建基因文庫的過程,其中需要單鏈mRNA通過A過程形成雜交雙鏈分子,需要逆轉(zhuǎn)錄酶,D過程需要回收未雜交的含 32P 的 cDNA 單鏈,繼而通過人工合成,獲得雙鏈cDNA,并用其構(gòu)建基因文庫。
(2)其中檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA ,若檢測目的基因是否成功表達(是否合成相關(guān)蛋白質(zhì)),則需用抗原-抗體雜交方法,該方法的原理是抗原與抗體的特異性結(jié)合。
(3)質(zhì)粒X既有四環(huán)素抗性基因Tetr ,藍色顯色基因lacZ ,便于對目的基因進行監(jiān)測和篩選。因此能做為載體的最理想的質(zhì)粒是X,NotⅠ的切割位點位于目的基因兩側(cè),不會破壞目的基因,而EcoRⅠ的切割位點位于基因中間,會破壞目的基因,因此用選定的質(zhì)粒與圖 2 的目的基因構(gòu)建基因表達載體時,應(yīng)選用的限制酶是NotⅠ。若用 EcoRⅠ完全酶切上述①中獲得的重組質(zhì)粒,并進行電泳觀察,可出現(xiàn)四種長度不同的片段,分析重組質(zhì)粒,合并重復(fù)長度可知其長度分別為 1.7kb、5.3kb、3.1kb和3.9kb。
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】甲圖表示高等植物細胞進行有絲分裂的簡圖,乙圖表示細胞分裂的不同時期染色體數(shù)、DNA數(shù)量變化的關(guān)系,丙圖表示細胞分裂的不同時期每條染色體中DNA含量變化的關(guān)系。據(jù)圖回答問題:
(1)觀察根尖有絲分裂時應(yīng)選擇____________區(qū)細胞。甲圖中其分裂順序依次是____________(用字母和箭頭表示)。
(2)甲圖中圖示作為一個細胞周期還缺少處于___________期的細胞簡圖,該時期的主要特點是_____________________。
(3)甲圖的C圖中,染色體數(shù)、核DNA數(shù)、染色單體數(shù)分別是________________。
(4)該生物與動物細胞有絲分裂的區(qū)別主要在甲圖____________兩個時期(用字母表示)。
(5)乙圖中代表染色體數(shù)量變化的是__________________(填“實線”或“虛線”)。
(6)在甲圖A、B、C、D中,對應(yīng)丙圖BC段的是_______________________。丙圖中CD段形成的原因是_________________________________________________。
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【題目】鑒定脂肪實驗中,敘述錯誤的是( )
A.可選用花生作為鑒定材料
B.徒手切片時要盡量切出很薄的切片,這樣實驗現(xiàn)象較為明顯
C.應(yīng)用50%的NaCl洗去浮色
D.鏡檢時先在高倍鏡下找到目標(biāo)后再在低倍鏡下觀察
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科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下圖為研究滲透作用的實驗裝置,請回答下列問題:
(1)漏斗內(nèi)溶液()和漏斗外溶液()為兩種不同濃度的蔗糖溶液,漏斗內(nèi)外起始液面一致。滲透平衡時的液面差為,此時和濃度大小關(guān)系為______________。
(2)圖中半透膜模擬的是成熟植物細胞中的_______,兩者在物質(zhì)透過功能上的差異是_________。
(3)將制作好的紫色洋蔥鱗片葉表皮裝片浸潤在0.3g/mL的蔗糖溶液中,1分鐘后進行顯微觀察,結(jié)果如圖,表明葉表皮細胞發(fā)生了______________。
圖中N部分的成分是___________,實驗說明細胞膜與細胞壁在__________上存在顯著差異;如果將蔗糖溶液換成等滲的溶液,除能觀察到圖示過程外,還將能看到__________現(xiàn)象,原因是_______________________。
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【題目】科技人員發(fā)現(xiàn)了某種兔的兩個野生種群,一個種群不論雌雄后肢都較長,另一種群不論雌雄后肢都較短。為確定控制后肢長、短這一相對性狀的基因顯隱性關(guān)系及基因所在位置是位于常染色體還是位于性染色體的Ⅰ、Ⅱ1 Ⅱ2片段(如圖),興趣小組同學(xué)進行了分析和實驗。(注:I區(qū)段為X染色體與Y染色體的同源區(qū)段,在此區(qū)段中有等位基因;Ⅱ1為Y染色體上特有區(qū)段,Ⅱ2為X染色體上特有區(qū)段)
(1)在兔的種群中Ⅱ2片段是否有等位基因_________(填是或否),兔在繁殖過程中性染色體上能發(fā)生基因重組的片段是_____________。
(2)首先同學(xué)們認為可以確定控制后肢長、短的基因不位于Ⅱ1,理由是________________。
(3)同學(xué)們分別從兩種群中選多對親本進行了以下兩組實驗:甲組:♂后肢長×♀后肢短→F1后肢短;乙組:♀后肢長×♂后肢短→F1后肢短。從兩組實驗中可得到以下結(jié)論:后肢長度的顯隱性關(guān)系為_________。在此基礎(chǔ)上可以確定基因不位于___________________,理由________________。
(4)為進一步確定基因位置,同學(xué)們準(zhǔn)備分別用乙組的F1與親代個體進行兩組回交實驗:①F1雌×親代雄、②F1雄×親代雌,以確定基因位于I區(qū)段還是位于___________________。假設(shè)基因位于I片段(用B,b表示),則乙組親本:♀基因型___________,♂基因型__________。在兩組回交實驗中,能確定基因位置的是____________填①或②)。請用遺傳圖解分析說明回交實驗?zāi)艽_定基因位置的原因。_____
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【題目】下面甲圖表示某分裂過程中某種物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的數(shù)量變化曲線;乙圖丙圖分別表示某分裂過程中某一時期的圖像。下列有關(guān)說法正確的是
A. 精原細胞有絲分裂過程中不會出現(xiàn)乙圖所示的情況
B. 卵原細胞減數(shù)分裂過程中不會出現(xiàn)丙圖所示的情況
C. 甲圖可表示減數(shù)分裂過程中同源染色體對數(shù)的變化曲線
D. 甲圖可表示減數(shù)分裂過程中細胞內(nèi)著絲點數(shù)目的變化曲線
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