Question

如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamH I、Hind III、Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．據(jù)圖回答：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可用一種或多種限制酶進(jìn)行切割．為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體應(yīng)選用

 

限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養(yǎng)基上進(jìn)行．（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是

 

（填字母代號(hào)）．
A．啟動(dòng)子     B．tet^R     C．復(fù)制原點(diǎn)    D．a(chǎn)mp^R
（3）過程①可采用的操作方法是

 

（填字母代號(hào)）．
A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化    B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化    C．顯微注射    D．細(xì)胞融合
（4）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程②可獲得多個(gè)新個(gè)體．這利用了細(xì)胞的

 

性．
（5）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用

 

（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A．核酸分子雜交     B．基因序列分析     C．抗原-抗體雜交     D．PCR．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：結(jié)合題意分析圖解：圖中質(zhì)粒包括四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動(dòng)子、復(fù)制原點(diǎn)，以及兩個(gè)限制酶切點(diǎn)，并且兩個(gè)限制酶切點(diǎn)的位置均在四環(huán)素抗性基因上；目的基因上有三個(gè)限制酶切點(diǎn)，與質(zhì)粒對(duì)照，共有的是BamH I、Hind III．
圖中①表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)．

解答： 解：（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點(diǎn)，目的基因上也有它們的酶切位點(diǎn)，應(yīng)用此2種酶切．當(dāng)人乳鐵蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）能讓目的基因開始表達(dá)的是啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度．
（3）將目的基因?qū)�入到�?dòng)物中常用顯微注射法．
（4）對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程胚胎移植過程可獲得多個(gè)新個(gè)體都發(fā)育成了個(gè)體，這體現(xiàn)了細(xì)胞全能性．
（5）一般檢測(cè)目的基因是否表達(dá)里用抗原-抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）BamHI和HindIII    含氨芐青霉素
（2）A 
（3）C
（4）全能性
（5）C

點(diǎn)評(píng)：本題難度適中，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的限制酶的作用特點(diǎn)、啟動(dòng)子的功能、目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法等相關(guān)知識(shí)，要求考生具有一定的識(shí)圖能力，并能識(shí)記相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)．