【題目】回答下列關(guān)于微生物和酶的問題。

環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解,研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶。

(1)下列培養(yǎng)基中能有效分離聯(lián)苯降解菌的是____,原因是____________________________________________________________。

A培養(yǎng)基(g/L):某生長因子2.0,(NH4)2SO42.0,K2HPO43.0,MgSO41.0,pH 7.4,多聚聯(lián)苯50 mL

B培養(yǎng)基(g/L):牛肉膏10.0,蛋白胨20.0,葡萄糖20.0,NaCl 5.0,pH 7.4

C培養(yǎng)基(g/L):某生長因子2.0,淀粉20.0,NH4NO32.5,MgCl20.5,K2HPO43.0,多聚聯(lián)苯50 mL,pH 7.4

進一步研究發(fā)現(xiàn),不同的金屬離子對聯(lián)苯水解酶的活性有一定影響,結(jié)果見下表:

金屬離子

(mmoL/L)

相對活性

(%)

對照組

100

Mn2+

123

 Co2+

79

 Mg2+

74

(2)依據(jù)表中結(jié)果,金屬離子________對該酶的活性有一定的促進作用。金屬離子對酶的活性有促進或抑制作用,可能的原因是____________________________________________。

(3)通過酶工程可將聯(lián)苯水解酶用于生產(chǎn)實踐。酶工程通常包括酶的生產(chǎn)、______________、酶的固定化和酶的應用等方面。酶固定化的好處是___________________________________________。

(4)下圖實線表示聯(lián)苯水解酶催化的反應速度與酶濃度的關(guān)系,虛線表示在其他條件不變的情況下,底物濃度增加一倍,反應速度與濃度的關(guān)系,能正確表示兩者關(guān)系的是________。

(5)紅球菌和假單孢菌都能降解多聚聯(lián)苯,但研究發(fā)現(xiàn)以每克菌體計算,兩種菌降解多聚聯(lián)苯的能力有所不同,對此現(xiàn)象合理的假設(shè)是____________________________________________________

【答案】(1)A 該培養(yǎng)基中有多聚聯(lián)苯為唯一碳源

(2)①Mn2+金屬離子與酶結(jié)合可以改變酶的空間結(jié)構(gòu)(尤其是活性部位的結(jié)構(gòu))

酶的分離純化 便于重復利用,能連續(xù)進行反應

③B

兩種菌內(nèi)酶量不同 兩種菌內(nèi)酶基因的結(jié)構(gòu)(酶結(jié)構(gòu))不同

【解析】(1)A培養(yǎng)基中只有多聚聯(lián)苯一種碳源,只有聯(lián)苯降解菌可以利用這一種碳源而生存。因此,A培養(yǎng)基可以作為分離聯(lián)苯降解菌的選擇培養(yǎng)基。(2)①根據(jù)表格數(shù)據(jù),當培養(yǎng)基中添加Mn2+,能使聯(lián)苯水解酶的活性升高。金屬離子是通過與酶結(jié)合后,改變酶的空間結(jié)構(gòu)來影響酶活性的。酶具有專一性、高效性,酶催化后,酶分子結(jié)構(gòu)不改變,如果能利用酶工程將酶固定下來,便可以重復利用,使酶的催化反應連續(xù)進行。酶工程的操作包括酶的生產(chǎn)、酶的分離純化、酶的固定化和酶的應用等幾個方面。影響酶促反應速度的因素有酶濃度、底物濃度和溫度、pH等反應條件。在反應條件適宜,酶量不足的情況下,增加底物量,酶促反應速度不增加,此時酶促反應速度的限制因子是酶濃度。隨著酶濃度的增加,當酶濃度不是酶促反應速度的限制因子時,底物量增加,酶促反應速度增加。紅球菌和假單孢菌降解多聚聯(lián)苯的能力不同的原因可能是兩種菌內(nèi)酶量不同,或者是兩種菌內(nèi)酶結(jié)構(gòu)的不同致使酶活性不同。

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(3)③為__________________過程之后,兩者最終融合為一體成為一個新的雜種細胞。

(4)在形成再生植株的過程中,與組織培養(yǎng)相似的步驟是________

(5)培養(yǎng)的雜種植株在形態(tài)上表現(xiàn)為________,其根本原因是_______________________。

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(3)已知限制酶E識別序列為CCGG,若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的p53基因部分區(qū)域(見上圖),那么正常人的會被切成_______個片段,而患者的則被切割成長度為________對堿基和________對堿基的兩種片段。

(4)如果某人的p53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后,共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段,那么該人的基因型是___________(以P+表示正;,P-表示異常基因)。

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