Question

【題目】如圖所示為培育二倍體轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的兩種思路。EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ為限制酶（箭頭所指為酶切位點(diǎn)）�；卮鹣铝袉栴}：

（1）據(jù)圖，獲取目的基因時不能選擇SmaⅠ的原因是它_________________________。選擇EcoRⅠ和BamHⅠ的優(yōu)點(diǎn)是可避免目的基因與質(zhì)粒________連接。

（2）與思路1相比，思路2的最大優(yōu)點(diǎn)是獲得的轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米________________。

（3）培育轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的核心步驟是__________________________，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中_____________________________________________________。

（4）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，這跟農(nóng)桿菌的____________________________________有關(guān)。

（5）操作⑤常用的方法是_________________________。

Answer 1

【答案】 破壞目的基因的結(jié)構(gòu) 反向 都是純合子（或答不發(fā)生性狀分離） 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 穩(wěn)定存在并可遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 Ti質(zhì)粒上具有T-DNA 用秋水仙素處理幼苗

【解析】試題分析：本題綜合考查學(xué)生對基因工程的相關(guān)知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解基因工程的基本操作程序及其應(yīng)用的相關(guān)知識并形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題圖和題意中提取有效信息并與單倍體育種建立聯(lián)系，進(jìn)行相關(guān)問題的解答。

(1) 題圖顯示：目的基因中存在SmaⅠ的識別位點(diǎn)。若使用SmaⅠ切割外源DNA，則會破壞外源DNA中的目的基因的結(jié)構(gòu)，因此獲取目的基因時不能選擇SmaⅠ切割。EcoRⅠ和BamHⅠ的識別位點(diǎn)不同，形成的黏性末端不同，因此選擇EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNA，其優(yōu)點(diǎn)是可避免目的基因與質(zhì)粒反向連接。

(2) 思路1是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入玉米的受精卵中，由該受精卵發(fā)育成的植株不一定都是純合子，思路2是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入由花粉經(jīng)過脫分化形成的愈傷組織中，由該愈傷組織形成的單倍體幼苗2再經(jīng)過人工誘導(dǎo)，使其染色體加倍，最終得到的玉米株都是純合子。可見，與思路1相比，思路2的最大優(yōu)點(diǎn)是獲得的轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米都是純合子（或答不發(fā)生性狀分離）。

(3) 培育轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米采用的是基因工程技術(shù)，該技術(shù)的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并可遺傳給下一代，同時使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。

(4) 農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上具有T—DNA，T—DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。在培育轉(zhuǎn)基因植物時，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，正是利用了農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上具有的T—DNA的這一特點(diǎn)。操作⑤是人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，常用的方法是用秋水仙素處理幼苗。