Question

【題目】人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用_________切割后，通過(guò)DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用_________技術(shù)。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對(duì)供體母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要經(jīng)過(guò)__________，才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是__________。為了獲得母羊，移植前需對(duì)已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得８多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的__________。

（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測(cè)到__________，說(shuō)明目的基因成功表達(dá)。

Answer 1

【答案】（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶） DNA分子雜交（或核酸探針）

（2）超數(shù)排卵；獲能（處理）

（3）顯微注射法 性別鑒定；全能性

（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）

【解析】

試題分析：（1）在基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，把目的基因與運(yùn)載體一般用同種限制酶進(jìn)行切割，再用DNA連接酶連接，以構(gòu)建基因表達(dá)載體；檢測(cè)目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)。

（2）超數(shù)排卵處理時(shí)，需要注射促性腺激素；采集的精子必須經(jīng)過(guò)獲能處理后才具備受精能力。

（3）將重組DNA分子導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；為了獲得母羊，胚胎移植前需要對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定；利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可以獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性。

（4）目的基因基因成功表達(dá)的標(biāo)志是htPA基因（目的基因）在母羊的羊乳細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)（人組織纖溶酶原激活物）。