Question

【題目】某化工廠的污水池中，含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。請(qǐng)分析回答問(wèn)題。

（1）接種前需要對(duì)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法是____________。培養(yǎng)基滅菌后，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_________ 。

（2）實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是____________。

（3）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量________的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，為獲得單菌落進(jìn)行繼續(xù)篩選，常采用______________或____________法，接種后，應(yīng)將培養(yǎng)皿________(填“正放”或“倒置”)

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后，才能倒掉。

（6）微生物的鑒定：為檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的____________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基中加入_____________指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變___________色。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 5．0×108 異養(yǎng)需氧型 減少 增加 平板劃線法 稀釋涂布平板 倒置 滅菌 選擇 酚紅 紅

【解析】

（1）實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。
（2）常用的接種方法有①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）接種前需要對(duì)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；培養(yǎng)基滅菌后，將1mL水樣稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為51、50和49，據(jù)此可得出每升水樣（1L=1000mL）中的活菌數(shù)=（51+50+49）/3×1000×10×1000=5.0×108。

（2）實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌”的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。

（3）由于“目的菌”有降解有機(jī)化合物A的作用，所以培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)基；再接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量進(jìn)一步增加。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，分離獲得單菌落；接種到固體培養(yǎng)基后，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。

（5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）微生物的鑒定：為檢測(cè)尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色。