Question

【題目】馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無機鹽，我國已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進行產(chǎn)業(yè)化開發(fā)。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過程，請分析回答問題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細胞研磨液中提取抗鹽基因的_________來合成cDNA。

（2）上圖構(gòu)建基因表達載體時，最好選用_________酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒，不能使用Sma l切割的原因是_________________________________。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動子，啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的_______片段。

（3）將基因表達載體導入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是________。通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以_________________。

（4）從個體水平上檢驗轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是___________________。

Answer 1

【答案】（每空1分，共7分）（1）mRNA

（2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA

（3）T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA 穩(wěn)定維持和表達

（4）將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長

【解析】（1）基因工程中，獲取目的基因時可以利用mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。

（2）圖中質(zhì)粒的標記基因為抗生素抗性基因，而SmaI的切割位點就在該基因和目的基因上，因此用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI切割，則應該用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒�；�因表達載體中啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段。

（3）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA，可以將目的基因帶入馬鈴薯細胞，并將目的基因插入到馬鈴薯細胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。

（4）檢驗轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功，從個體水平上來講，可以將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長。