Question

【題目】泡菜的制作離不開乳酸菌，但酵母菌對泡菜的風(fēng)味和品質(zhì)也有著重要影響，為研究泡菜發(fā)酵過程中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化和pH變化，科研人員選用3份泡菜“老鹽水”Y1、Y2、Y3和新鮮蘿卜進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。請完善下列實(shí)驗(yàn)過程并分析回答：

(1)制作泡菜

______________________

(2)酵母菌的分離、純化及鑒定

無菌操作下每天取泡菜鹽水25mL，加入________mL無菌水中，將樣品稀釋十倍，再依次稀釋成102、103、104、105倍稀釋液，分別接種涂布，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，觀察菌落特征，并選取培養(yǎng)基上的________用于DNA分子鑒定。

(3)菌落計(jì)數(shù)和鹽水中的pH值測定

選取便于計(jì)數(shù)的培養(yǎng)基對不同種酵母菌的菌落分別計(jì)數(shù)，用此方法計(jì)數(shù)和直接在顯微鏡下計(jì)數(shù)菌體相比，得到的數(shù)值往往偏小，原因有________，________。同時(shí)，每天用精密pH計(jì)測定鹽水中的pH值。

(4)結(jié)果分析

實(shí)驗(yàn)持續(xù)15天，部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

①發(fā)酵后期，膜璞畢赤酵母數(shù)量減少，甚至消失，從種間競爭的角度分析原因可能是__________________________________________________。

②采用Y1老鹽水泡制蘿卜10d后，泡菜表面出現(xiàn)白膜(俗稱“生花”)，這可能與Y1發(fā)酵液中后期________較多有關(guān)，其存在時(shí)間較長的原因可能是__________________________________________________。

Answer 1

【答案】密封 225 單菌落 此方法只計(jì)算活菌數(shù)，直接在顯微鏡下計(jì)數(shù)菌體活菌和死菌全部算入 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的僅是一個(gè)菌落 乳酸菌大量產(chǎn)生乳酸，降低pH值，逐漸抑制酵母菌而成為優(yōu)勢菌群 膜璞畢赤酵母(或酵母菌) 在發(fā)酵過程中，Y1發(fā)酵液pH值下降緩慢

【解析】

泡菜制作流程如下

（1）密封發(fā)酵：在壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌所需的無氧環(huán)境。

（2）假設(shè)加入xml水，25/(25+x)=1/10，得x=225，進(jìn)行DNA分子鑒定是應(yīng)選單菌落，單菌落是由一個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來的子細(xì)胞群體。

（3）能用于計(jì)數(shù)的微生物接種方法是稀釋涂布平板法，用此方法計(jì)數(shù)和直接在顯微鏡下計(jì)數(shù)菌體相比，得到的數(shù)值往往偏小，原因：此方法只計(jì)算活菌數(shù)，直接在顯微鏡下計(jì)數(shù)菌體活菌和死菌全部算入，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的僅是一個(gè)菌落。

（4）①乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸大量產(chǎn)生乳酸，降低pH值，逐漸抑制酵母菌而成為優(yōu)勢菌群。②白膜(俗稱“生花”)是 膜璞畢赤酵母(或酵母菌)在液面大量繁殖形成的，分析表格可知在發(fā)酵過程中，Y1 與兩外兩組相比較發(fā)酵液pH值下降緩慢，這是酵母菌存在時(shí)期較長的原因。