【題目】如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI、SamI的酶切位點(diǎn),P為啟動(dòng)子,T為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI、SamI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。外源DNA插入到ampR或tctR中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(ampR表示氨芐青霉素抗性基因,tctR表示四環(huán)素抗性基因);卮鹣铝袉(wèn)題:
(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些_________。在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外,還有___________、動(dòng)植物病毒等,它們來(lái)源不同,在大小、結(jié)構(gòu)、復(fù)制以及插入片段大小上也有很大差別。
(2)一般為避免在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)出現(xiàn)自身環(huán)化,該質(zhì)粒用限制酶切割時(shí)應(yīng)該用________酶進(jìn)行切割,切割過(guò)程中消耗了___________個(gè)水分子。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程,稱之為_____________________。構(gòu)建出來(lái)的基因表達(dá)載體在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí),RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)是____________。
(3)若將此質(zhì)粒用EcolR I酶切割后,與用EcolR I酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌(大腸桿菌本身不含該質(zhì)粒),結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。其中,可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái)的大腸桿菌是____________,能在同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的是______________。
(4)假如該質(zhì)粒載體為來(lái)自土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒,將其攜帶的抗蟲(chóng)基因整合到某植物細(xì)胞的染色體DNA上,將該細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成植株后,發(fā)現(xiàn)其并無(wú)抗蟲(chóng)特性,其可能的原因是__________(答出1種情況即可)
【答案】 具有調(diào)控作用的因子 λ噬菌體的衍生物 EcoRI、BamHI酶 4 轉(zhuǎn)化 啟動(dòng)子(或P) 含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的 含有質(zhì)粒載體 抗蟲(chóng)基因并未表達(dá)(或未轉(zhuǎn)錄或未翻譯);抗蟲(chóng)基因表達(dá)的水平極低或產(chǎn)生的抗蟲(chóng)蛋白沒(méi)有活性
【解析】試題分析:用EcoRI酶切出的目的基因和質(zhì)粒具有相同的黏性末端,如果放在一起加入DNA連接酶,則可出現(xiàn)3種連接結(jié)果.載體自身形成的連接物能重新形成完整的tetR基因,具有抗四環(huán)素的特點(diǎn),其他連接物中tetR基因被限制性內(nèi)切酶破壞,不再具有抗四環(huán)素的特點(diǎn);在整個(gè)操作過(guò)程中,ampR基因保持完整,載體(質(zhì)粒)自身連接形成的連接物和目的基因-載體連接物(重組質(zhì)粒)都具有抗青霉素的特性。
(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。基因工程中運(yùn)輸目的基因的載體,常見(jiàn)的有質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒。
(2)根據(jù)題干信息和圖形分析,目的基因兩端有EcoRI酶切點(diǎn)和BamHI酶切點(diǎn),在質(zhì)粒載體上也有這兩種酶的切點(diǎn),所以可以用這兩種酶切出非同源性互補(bǔ)末端來(lái)阻止其他連接。切割質(zhì)粒時(shí)有兩個(gè)切點(diǎn),破壞了4個(gè)磷酸二酯鍵,所以消耗了4分子的水。轉(zhuǎn)化指的是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。
(3)含有質(zhì)粒載體和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌都含有氨芐青霉素抗性基因,所以都可以在氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來(lái),其中能在同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的是含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌。
(4)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得的植物沒(méi)有抗蟲(chóng)特性,可能是基因沒(méi)有選擇性表達(dá),有可能抗蟲(chóng)基因表達(dá)的水平極低或產(chǎn)生的抗蟲(chóng)蛋白沒(méi)有活性。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下列有關(guān)純合子的敘述錯(cuò)誤的是
A.由相同基因的雌雄配子結(jié)合并發(fā)育而來(lái)
B.連續(xù)自交,性狀能穩(wěn)定遺傳
C.雜交后代一定是純合子
D.不含等位基因
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖表示自然界中遺傳信息在三種大分子間的流動(dòng)(如箭頭二代表轉(zhuǎn)錄),相關(guān)說(shuō)法正確的是
A. 3,7少見(jiàn),其他常見(jiàn)
B. 2,4,6常見(jiàn),其他幾乎從未被證實(shí)
C. 5、8、9未被證實(shí),3、7少見(jiàn),其他常見(jiàn)
D. 1、2、4常見(jiàn),3、7少見(jiàn),其他尚未被證實(shí)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖為牛胚胎性別鑒定及分割示意圖,下列有關(guān)說(shuō)法正確的是
A. A是囊胚胎,丙過(guò)程是胚胎移植
B. 進(jìn)行胚胎分割時(shí),要注意將滋養(yǎng)層細(xì)胞均等分割
C. 胚胎分割所需要的主要儀器設(shè)備為普通顯微鏡和顯微操作儀
D. 一般從結(jié)構(gòu)D中取樣分離出胚胎干細(xì)胞,用于DNA分析性別鑒定
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】為了探究生長(zhǎng)素(IAA)和乙烯(ACC是乙烯的供體)對(duì)植物生根的影響,科學(xué)家用擬南芥下胚軸插條進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn),結(jié)果如下圖所示。有關(guān)分析正確的是
A. 促進(jìn)擬南芥下胚軸插條生根的最適宜生長(zhǎng)素濃度為50μmol/L
B. 兩種激素濃度為0時(shí),擬南芥下胚軸插條仍能生根,這與其自身的激素有關(guān)
C. 擬南芥下胚軸插條細(xì)胞中,生長(zhǎng)素和乙烯是同時(shí)合成并發(fā)揮作用的
D. ACC對(duì)擬南芥下胚軸插條生根作用的影響是促進(jìn)其生根
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖是甲、乙兩種單基因遺傳病的系譜圖,有關(guān)分析正確的是( )
A. 4號(hào)患甲病說(shuō)明1號(hào)和2號(hào)遵循基因的自由組合定律
B. 6號(hào)和7號(hào)與甲病有關(guān)的基因型相同的概率為1/3
C. 從1號(hào)個(gè)體及子女推知乙病是常染色體隱性遺傳病
D. 若3號(hào)不攜帶乙病致病基因,則乙病是伴X染色體隱性遺傳病
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)定向誘導(dǎo)分化出人造組織器官進(jìn)行自體移植,可以解決臨床上存在的供體器官不足和移植后免疫排斥的問(wèn)題,下圖表示胚胎干細(xì)胞分離和定向誘導(dǎo)分化的流程圖,其中①④為細(xì)胞或細(xì)胞結(jié)構(gòu),ⅠⅣ為操作過(guò)程,下列敘述與圖中不相符的是
A. 圖中所涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
B. 圖中ES細(xì)胞是由③分離來(lái)的,此外還可以從原始性腺中分離
C. ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上不會(huì)向不同類型的組織細(xì)胞分化
D. 過(guò)程Ⅴ的結(jié)果多種多樣的原因在于基因的選擇性表達(dá)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】【加試題】如圖表示葉綠體中各色素的吸收光譜,據(jù)圖判斷,下列判斷錯(cuò)誤的是
A. 在研究葉綠素的過(guò)程中,為避免類胡蘿卜素的干擾,應(yīng)該選用紅橙光區(qū)
B. 進(jìn)入秋季,植物對(duì)420nm-450nm波長(zhǎng)的光的利用量減少
C. 用450nm波長(zhǎng)的光比用600nm波長(zhǎng)的光更能提高光合作用強(qiáng)度
D. 用550nm波長(zhǎng)的光改用670nn波長(zhǎng)的光后短時(shí)間內(nèi)葉綠體中三碳酸含量增加
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