Question

【題目】為獲得高效降低膽固醇的乳酸菌，科研人員作了如下實驗。

（1）取適量發(fā)酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入__________制成1:10稀釋液，再梯度稀釋到10-6的稀釋液，涂布于添加了CaCO3的乳酸幼苗培養(yǎng)基（MRS培養(yǎng)基）平板上，在__________條件下恒溫靜置培養(yǎng)48小時。挑取具有__________的菌落純化培養(yǎng)，通常使用的劃線工具是__________。示意圖A和B中__________表示的是該方法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果�？赏ㄟ^觀察菌落的__________判斷是否達(dá)到了純化。

（2）純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定__________（填“上清液或沉淀細(xì)胞”）中膽固醇的含量，以____________________作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出具有目的菌株。

Answer 1

【答案】 無菌水 無氧 溶鈣圈（或“透明圈”） 接種環(huán) A 形態(tài)、大小 上清液 未接種的高膽固醇培養(yǎng)液

【解析】由題意和圖形可知該題考查微生物的分離和純化相關(guān)知識，意在考察考生對知識點的識記理解和應(yīng)用能力。

（1）配制稀釋液應(yīng)該用無菌水，可以防止外來雜菌的污染，保證培養(yǎng)的菌種的純度。因為培養(yǎng)的是乳酸菌，其是嚴(yán)格的厭氧型細(xì)菌，所以培養(yǎng)時應(yīng)在無氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)。乳酸菌能利用CaCO3，所以應(yīng)挑選具有透明圈的菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。劃線接種的工具是接種環(huán)，該接種方法是在培養(yǎng)基上劃區(qū)域，除了首次其余的都是從上次劃線的末端開始，在A和B中A表示的是平板劃線法，B是稀釋涂布平板法。通過觀察菌落的形態(tài)、大小來判斷是否達(dá)到了純化，如果菌落的形態(tài)、大小都基本相同，說明獲得的菌種單一，如果出現(xiàn)了多種，說明沒有達(dá)到純化的目的。

（2）因為分離得到的該乳酸菌能高效降低膽固醇，所以接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)離心后要測定的是上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養(yǎng)液作為對照，以測定菌株降膽固醇的能力。