Question

【題目】女性懷孕后會(huì)分泌一種糖蛋白---絨毛膜促性腺激素(HCG)，尿液中會(huì)檢出HCG的存在。用抗HCG單克隆抗體制備的試紙可以測(cè)試女性是否懷孕。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，請(qǐng)分析回答：

（1）制備單克隆抗體利用的生物學(xué)技術(shù)有____________________________。給小鼠注射的HCG相當(dāng)于__________。

（2）融合過(guò)程中需用到的生物誘導(dǎo)劑是____________；只考慮細(xì)胞的兩兩融合，融合后乙有______種。

（3）用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選，所得細(xì)胞丙的特點(diǎn)是____________________________。對(duì)丙檢測(cè)篩選得到丁，所采用操作技術(shù)依據(jù)的原理是_____________________________。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合 抗原 滅活的病毒 3 既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體 抗原一抗體雜交

【解析】

圖示過(guò)程包括動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，利用骨髓瘤細(xì)胞無(wú)限增殖和漿細(xì)胞產(chǎn)生單一抗體的特點(diǎn)，制備雜交瘤細(xì)胞，從而生產(chǎn)單克隆抗體。

（1）根據(jù)分析可知，制備單克隆抗體利用的生物學(xué)技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。給小鼠注射的HCG相當(dāng)于抗原，可刺激小鼠產(chǎn)生漿細(xì)胞。

（2）動(dòng)物細(xì)胞融合的促融方法除物理法和化學(xué)法外，還有生物誘導(dǎo)法。常用生物誘導(dǎo)劑是滅活病毒；只考慮兩兩融合，融合后的細(xì)胞有骨髓瘤細(xì)胞自身融合、B淋巴細(xì)胞自身融合和雜交瘤細(xì)胞3種。

（3）用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選，所得丙雜交瘤細(xì)胞應(yīng)既能夠無(wú)限增殖，又可以產(chǎn)生單一抗體。檢測(cè)丙是否能產(chǎn)生單一抗體，可采用抗原一抗體雜交方法。

項(xiàng)目	第一次篩選	第二次篩選
篩選 原因	誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)
篩選 方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選 目的	得到雜交瘤細(xì)胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞