ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下:
第①步:用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步:將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質(zhì)粒2。
第④步:將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同,所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組,產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問(wèn)題:
(1)第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物,其作用是 。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟,其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是 。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí),為保證成功率,往往使用 酶對(duì)基 因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開(kāi)。
(4)質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,其化學(xué)本質(zhì)是 ,此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
(5)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用 制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。
(1)TaqDNA聚合酶 與模板結(jié)合,使DNA聚合酶從引物3’端延伸DNA鏈
(2)引物通過(guò)堿基互補(bǔ)與DNA模板鏈結(jié)合
(3)同一種DNA限制性內(nèi)切酶 磷酸二酯鍵
(4)小型環(huán)狀DNA
(5)紅霉素抗性基因 紅霉素
【解析】
試題分析:(1)PCR中DNA聚合酶具有耐高溫的能力,稱為TaqDNA聚合酶;引物一般為一小段單鏈DNA或RNA,與模板結(jié)合,使DNA聚合酶從引物3’端延伸DNA鏈。
(2)PCR分三步:第一是變性,主要是DNA雙鏈解開(kāi),第二是退火,也稱復(fù)性,主要是引物與DNA單鏈結(jié)合,第三是延伸,主要是新的DNA單鏈延伸。
(3)注意用同一種限制性內(nèi)切酶,才能切出相同的黏性末端,從而才能相連;限制性內(nèi)切酶破壞的是磷酸二酯鍵。
(4)質(zhì)粒是存在于細(xì)菌擬核外能夠自主復(fù)制呈環(huán)狀的很小的DNA分子。
(5)因?yàn)橹亟M質(zhì)粒中含有紅霉素抗性基因,所以可用紅霉素抗性基因制成探針,讓探針與重組質(zhì)粒中含有紅霉素抗性基因發(fā)生雜交。在含有紅霉素的培養(yǎng)基中,如果細(xì)菌仍能生存,說(shuō)明導(dǎo)入了重組基因。
考點(diǎn):本題考查基因工程以及PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:閱讀理解
ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下:
第①步:用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步:將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質(zhì)粒2。
第④步:將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同,所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組,產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問(wèn)題:
(1)第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物,引物的實(shí)質(zhì)是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟,其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響,應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照? 。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí),為保證成功率,往往使用 酶
對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開(kāi)。
(4)質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,其化學(xué)本質(zhì)是 ,此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
(5)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用 制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。
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科目:高中生物 來(lái)源:湖南省雅禮中學(xué)2010屆高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
(10分)ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下:
第①步:用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步:將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質(zhì)粒2。
第④步:將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同,所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組,產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問(wèn)題:
(1)第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物,引物的實(shí)質(zhì)是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟,其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響,應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照? 。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí),為保證成功率,往往使用 酶
對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開(kāi)。
(4)質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,其化學(xué)本質(zhì)是 ,此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
(5)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用 制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。
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科目:高中生物 來(lái)源:湖南省2010屆高三第三次月考生物試卷 題型:綜合題
(10分)ch1L基因是藍(lán)藻擬核DNA上與葉綠素合成有關(guān)的基因。為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制,需要構(gòu)建該種生物缺失ch1L基因的變異株細(xì)胞。構(gòu)建過(guò)程如下:
第①步:用PCR技術(shù)從藍(lán)藻環(huán)狀DNA中擴(kuò)增出ch1L基因片段。
第②步:將ch1L基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成重組質(zhì)粒1。
第③步:將重組質(zhì)粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除,用一段紅霉素抗性基因取代之,得到重組質(zhì)粒2。
第④步:將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入藍(lán)藻細(xì)胞,由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長(zhǎng)的序列相同,所以能準(zhǔn)確地與其發(fā)生同源重組,產(chǎn)生出缺失ch1L基因的突變株。請(qǐng)根據(jù)上述資料,回答下列問(wèn)題:
(1)第①步用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段時(shí)用到的耐高溫的酶通常是指什么酶? 。
PCR擴(kuò)增DNA時(shí)必須加入引物,引物的實(shí)質(zhì)是 ,其作用是 。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA一般要經(jīng)過(guò)三十多次循環(huán),每次循環(huán)都要經(jīng)過(guò)三個(gè)步驟,其中“復(fù)性”這一步驟發(fā)生的變化是 。為消除PCR擴(kuò)增過(guò)程當(dāng)中外源DNA污染造成的影響,應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照? 。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒1、2時(shí),為保證成功率,往往使用 酶
對(duì)基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以切出相同的黏性末端,便于連接。此酶的作用是將DNA分子的 鍵打開(kāi)。
(4)質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,其化學(xué)本質(zhì)是 ,此外還可用噬菌體、動(dòng)植物病毒作用為運(yùn)載體。
(5)導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進(jìn)行檢測(cè)和篩選,可用 制成探針,檢測(cè)是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 可將變異株細(xì)胞篩選出來(lái)。
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科目:高中生物 來(lái)源:0110 模擬題 題型:讀圖填空題
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