Question

【題目】蘋果干腐病是由一種名為茶藤子葡萄座腔菌的真菌引起的疾病，病菌通常由枝條傷口入侵感染，在傷口處形成潰瘍。某中學(xué)的科研小組計(jì)劃分離出該真菌，并進(jìn)行藥物防治實(shí)驗(yàn)，為蘋果干腐病的防治提供合理的建議。經(jīng)過查閱資料，確定了分離時(shí)所用的PDA培養(yǎng)基配方，如下表所示：

該真菌在上述PDA培養(yǎng)基上生長時(shí)有特定的形態(tài)特征：輻射狀白色匍匐菌絲，絨毛狀。

(1)要獲得菌落，則上表中還應(yīng)添加的成分是________。氯霉素在PDA培養(yǎng)基中的作用是____。培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、_____________、倒平板。等平板冷卻凝固后，應(yīng)將平板倒置，這樣做的目的是_________。

(2)用剪刀從染病枝條潰瘍處剪取lxlcm2的患病組織，并用0.1%的升汞進(jìn)行____，置于培養(yǎng)基中心，在合適條件下進(jìn)行培養(yǎng)，共培養(yǎng)五組。待菌落形態(tài)特征穩(wěn)定后，用_____法將該致病菌分別轉(zhuǎn)移至含有等量0.5%苦水堿劑、40%福美砷、清水的上述PDA培養(yǎng)基中進(jìn)行抗藥性實(shí)驗(yàn)，并每隔24h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目。

①選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的記錄作為結(jié)果，這樣做的目的是____。

②記錄結(jié)果如下：

從結(jié)果分析可知，_______ 能很好地抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐病。

Answer 1

【答案】瓊脂（或凝固劑） 抑制細(xì)菌等雜菌的生長 滅菌 以防止冷凝水污染培養(yǎng)基 消毒 平板劃線 可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落數(shù)目 0.5%苦水堿劑

【解析】

培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)要素，此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。根據(jù)物理狀態(tài)培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，一般固體培養(yǎng)基中會(huì)加入瓊脂作為凝固劑。

（1）培養(yǎng)菌落需要用固體培養(yǎng)基，而固體培養(yǎng)基需要加入瓊脂（或凝固劑）進(jìn)行凝固。分析表格物質(zhì)，氯霉素能夠抑制細(xì)菌等雜菌的生長，而真菌可以生存。培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。等平板冷卻凝固后，要將平板倒置放置，以防止冷凝水污染培養(yǎng)基。
（2）0.1%的升汞的作用是消毒，題中給出“每隔24h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目”，因此可以確定分離微生物用的方法是平板劃線法。
①為了避免因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏的菌落數(shù)目，因此要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的記錄作為結(jié)果。
②通過表格數(shù)據(jù)可知，不同條件下菌落數(shù)相比較，0.5%苦水堿劑作用后菌落數(shù)最少，因此0.5%苦水堿劑能很好的抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐病．