【題目】人乳鐵蛋白(hLF)對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究,主要流程如下圖,圖中Ase I Nhe ISal I、BamH I代表相關(guān)限制酶切點(diǎn),neo′為新霉素抗性基因,BLG基因?yàn)?/span>β-乳球蛋白基因,GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答:

1)過程①中,不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR,是因?yàn)?/span>_________。在RT-PCR過程中,加入的引物需在5'端添加____________兩種限制酶的識(shí)別序列,以便于hLF基因插入pEB中。

2)過程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是______________。過程③中,使用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞,依據(jù)的主要原理是_____________

3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng),能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入____________的細(xì)胞,再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中___________,以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還需要將成功表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊__________細(xì)胞中,再借助_____________技術(shù)孕育出羊羔。

【答案】hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá)) Sal IBamH I 使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá) 生物膜具有一定的流動(dòng)性 pEB質(zhì);pEBL質(zhì)粒 是否有綠色熒光 去核的卵母 早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1)目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

1)人肌肉細(xì)胞使高度分化的細(xì)胞,hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá)),故過程①中,不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCRSal IBamH I在質(zhì)粒上挨著,切割質(zhì)粒不破壞其他基因,故在RT-PCR過程中,加入的引物需在5'端添加Sal IBamH I兩種限制酶的識(shí)別序列,以便于hLF基因插入pEB中。

2)過程②重組載體的構(gòu)建,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。過程③重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,使用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞,依據(jù)的主要原理是生物膜具有一定的流動(dòng)性。

3neo′為新霉素抗性基因,具有抗新霉素的作用,故將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng),能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入pEB質(zhì);pEBL質(zhì)粒的細(xì)胞,GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因,作為標(biāo)記基因,可再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中是否有綠色熒光,以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。

4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還需要將成功表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中,再借助早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)孕育出羊羔。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】與單種相比,“玉米-大豆間種”(如下圖)可在不影響玉米產(chǎn)量的同時(shí)額外增加大豆種植面積和產(chǎn)量。為選擇適合間種的大豆品種,科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究,結(jié)果如下表。請(qǐng)回答:

大豆品種

種植方式

葉綠素a含量/mgdm-2

葉綠素b含量/mgdm-2

葉綠素a/b

凈光合速率/μmolm-2s-2

單株產(chǎn)量/g

品種1

單種

3681

0604

6094

1906

1354

間種

2249

0925

2432

1639

490

品種2

單種

3587

0507

7071

2008

2025

間種

2004

0946

2118

1663

1361

1)單種和間種都要保持合適的行間距,保證通風(fēng),有利于植株吸收__________,從而充分利用光反應(yīng)產(chǎn)生的____________,提高光合效率。

2)與單種相比,間種模式下大豆葉片凈光合速率降低,從環(huán)境因素角度分析,主要原因是____________,葉片中葉綠素a/b____________,這種變化是植物對(duì)_____________的適應(yīng)。

3)與單種相比,間種模式下品種1的凈光合速率下降不顯著,單株產(chǎn)量下降顯著,最可能的生理原因是______________,玉米-大豆間種時(shí),玉米的氮肥施用量減少,其原因是___________________。

4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,比較適合與玉米間種的大豆品種是_____________,判斷的主要依據(jù)是_________________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】在有光條件下,小麥葉肉細(xì)胞中物質(zhì)的運(yùn)輸趨勢(shì)不存在(

A.[H]由細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)進(jìn)入線粒體

B.ATP由類囊體膜運(yùn)至葉綠體基質(zhì)

C.CO2由線粒體基質(zhì)運(yùn)向細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)

D.需表達(dá)的基因由細(xì)胞核運(yùn)輸至細(xì)胞器

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】λ噬菌體有極強(qiáng)的侵染能力,能在細(xì)菌中快速進(jìn)行DNA復(fù)制,產(chǎn)生子代噬菌體。在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用λ噬菌體構(gòu)建基因表達(dá)載體,使其在受體細(xì)菌中大量擴(kuò)增外源DNA,以備研究使用,相關(guān)操作如下圖所示,請(qǐng)回答下列問題:

1)入噬菌體DNA上通常沒有合適的標(biāo)記基因,因此人工改造時(shí)需加裝合適的標(biāo)記基因,如上圖λgt10載體中的imm434基因。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需用到的酶是___________,外源DNA的插入位置應(yīng)位于imm434基因____________(填之中之外),原因是_______________________。

2)上述過程中的λ噬菌體也可以用同位素標(biāo)記侵染細(xì)菌法來證明其遺傳物質(zhì)是DNA,推測(cè)體外包裝用的蛋白質(zhì)含有的化學(xué)元素至少有_________種。λ噬菌體與新型冠狀病毒的主要相同點(diǎn)(結(jié)構(gòu)上)與區(qū)別之處分別是______________________。

3)利用體外包裝好的噬菌體進(jìn)行侵染培養(yǎng)時(shí),常常選用大腸桿菌這類原核生物,原因有____________(答出2點(diǎn))。侵染前應(yīng)對(duì)大腸桿菌進(jìn)行的處理是___________,即大腸桿菌轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細(xì)胞。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖甲為北極凍原生態(tài)系統(tǒng)中部分生物構(gòu)成的食物網(wǎng)。圖乙虛線方框內(nèi)表示一個(gè)生物群落,箭頭表示該生態(tài)系統(tǒng)能量流動(dòng)的方向。請(qǐng)據(jù)圖回答:

1)圖甲中北極狐和雷鳥之間的種間關(guān)系為___________。

2)圖乙中A代表的生態(tài)系統(tǒng)中成分是___________。

3)下表表示圖乙生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)情況。(單位:106J

同化總量

儲(chǔ)存能量

呼吸消耗

A

900

200

700

B

100

15

85

C

15

2

13

D

18

6

12

分析上表可知,流入該生態(tài)系統(tǒng)的總能量為___________106J)。第二營養(yǎng)級(jí)到第三營養(yǎng)級(jí)的能量傳遞效率為___________。

4)假如北極狐的能量15%來自雷鳥,20%來自雪兔,其余來自植物,且該生態(tài)系統(tǒng)能量從生產(chǎn)者到消費(fèi)者的傳遞效率為10%,從消費(fèi)者到消費(fèi)者的能量傳遞效率為20%,如果一定時(shí)期內(nèi),北極狐種群獲取的能量為80106J),那么一共需要植物固定的能量為___________106J)。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】雞的性別決定方式屬于ZW型。右圖是某種雞羽毛的毛色(相關(guān)基因用B、b表示)的遺傳圖解,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

A.圖中親代蘆花雄雞產(chǎn)生了兩種類型的配子

B.B基因是位于Z染色體上的顯性基因

C.子代中的蘆花雄雞和蘆花雌雞均為純合子

D.蘆花雌雞與非蘆花雄雞交配,子代中雌雞均表現(xiàn)為非蘆花

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖表示神經(jīng)細(xì)胞凋亡的過程。下列敘述錯(cuò)誤的是(

A.神經(jīng)細(xì)胞形成大量的突起可提高物質(zhì)運(yùn)輸?shù)男?/span>

B.死亡信號(hào)能誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的基因進(jìn)行選擇性表達(dá)

C.I和酶II可以進(jìn)入巨噬細(xì)胞參與神經(jīng)細(xì)胞的凋亡

D.癌細(xì)胞的細(xì)胞膜表面可能缺乏凋亡誘導(dǎo)因子受體

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖為植物體細(xì)胞雜交過程示意圖。據(jù)圖回答:

1)步驟①是_______________________,最常用的方法是___________________。

2)步驟②一般常用的化學(xué)試劑是___________,目的是____________________

3)在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過程中,運(yùn)用的技術(shù)手段是________,其中步驟④相當(dāng)于_______,步驟⑤相當(dāng)于_______。

4)原生質(zhì)體融合的目的是獲得_______。遠(yuǎn)緣雜交的兩個(gè)親本的遺傳特征能夠在新的植物體上有所表現(xiàn),其根本原因是________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列關(guān)于血糖平衡調(diào)節(jié)的敘述,正確的是(

A.胰島素的分泌僅與血糖濃度有關(guān)

B.胰島素降低血糖濃度的原理主要是切斷血糖的來源

C.胰島素和胰高血糖素通過協(xié)同作用,共同維持血糖含量的穩(wěn)定

D.胰島素的作用結(jié)果反過來導(dǎo)致胰島素的分泌減少屬于反饋調(diào)節(jié)

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