Question

【題目】疫苗和抗體已被廣泛應(yīng)用于預(yù)防與診療傳染性疾病的過(guò)程，已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原。疫苗的生產(chǎn)和抗體的制備流程如下圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)③構(gòu)建A基因重組載體時(shí)，啟動(dòng)子和終止子是重新構(gòu)建的，它們應(yīng)該能被受體細(xì)胞的________所識(shí)別，以便于其催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

(2)下圖為A基因的結(jié)構(gòu)示意圖，已知Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)是2000個(gè)，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個(gè)，空白區(qū)域中G和C的總數(shù)共有400個(gè)，則由該區(qū)域轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的mRNA中A和U總數(shù)是________個(gè)。

(3)在給小鼠皮下注射A蛋白時(shí)，要重復(fù)注射幾次的目的是通過(guò)二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的________數(shù)目。過(guò)程⑥的實(shí)質(zhì)為________。

(4)在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過(guò)________次篩選，其中包括_______________和__________,擴(kuò)大培養(yǎng)的原理是________。

(5)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的________來(lái)制備疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較，或用圖中的________與分離出的病毒進(jìn)行特異性檢測(cè)。

Answer 1

【答案】 RNA聚合酶 400 漿細(xì)胞 基因的選擇性表達(dá) 2 篩選出雜交瘤細(xì)胞 篩選出產(chǎn)生特定（抗A蛋白）抗體的雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞增殖(有絲分裂) A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】試題分析：本題考查基因工程、基因的表達(dá)、細(xì)胞工程、免疫，考查對(duì)基因表達(dá)載體組成、轉(zhuǎn)錄過(guò)程、單克隆抗體制備流程與應(yīng)用、二次免疫及免疫應(yīng)用的理解。解答此題，可根據(jù)基因中堿基比例關(guān)系和轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則進(jìn)行第（2）小題的計(jì)算，根據(jù)漿細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合結(jié)果分析兩次篩選的目的。

(1)A基因重組載體中，啟動(dòng)子和終止子是RNA聚合酶的識(shí)別部位，以開(kāi)始和結(jié)束轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

(2) Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)為2000個(gè)，減去陰影部分堿基數(shù)800個(gè)，得到空白區(qū)的堿基數(shù)為1200個(gè)，該區(qū)段能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成，其中C和G占400個(gè)，則A和T共800個(gè)，每條鏈中A和T有400個(gè)，轉(zhuǎn)錄以基因的一條單鏈為模板，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，轉(zhuǎn)錄得到的RNA中A和U應(yīng)為400個(gè)。

(3)給小鼠皮下注射A蛋白時(shí)，重復(fù)注射幾次的目的是讓小鼠產(chǎn)生更快、更強(qiáng)的二次免疫反應(yīng)，使記憶細(xì)胞增殖、分化，產(chǎn)生較多的漿細(xì)胞。過(guò)程⑥為B細(xì)胞的分化過(guò)程，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。

(4)漿細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合后，由于存在多種融合細(xì)胞，首先要用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，然后經(jīng)克隆化培養(yǎng)，用A蛋白作為抗原檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。擴(kuò)大培養(yǎng)過(guò)程中雜交瘤細(xì)胞通不斷的有絲分裂，增加雜交瘤細(xì)胞數(shù)目。

(5)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí)，圖中基因工程生產(chǎn)的病毒表面的A蛋白可作為疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生記憶細(xì)胞和抗體，但不會(huì)使人致病。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí)，可利用單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體與分離出的病毒進(jìn)行特異性檢測(cè)。