【題目】為增加油菜種子的含油量,研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連,導入油菜細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物,采用__________法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因。在上述引物設計時,分別在引物中加入下圖所示酶的識別序列,這樣可以用____________________酶處理兩個基因后,得到____________端(填圖中字母)相連的融合基因。

(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構建________________并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用__________培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。

(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是______________________________,進一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。

(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在____________酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)________的DNA片段設計引物進行擴增,對擴增結果進行檢測,可判斷融合基因是否完________

【答案】 PCR ClaⅠ(限制酶)和DNA連接 A、D 表達載體(或“重組質(zhì)!) 四環(huán)素 液體 利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎?/span> 逆轉(zhuǎn)錄 融合基因 轉(zhuǎn)錄

【解析】試題分析:本題以增加油菜種子的含油量為材料背景,考查基因工程的相關知識,關鍵能夠掌握目的基因獲取的方法,能夠結合圖解中限制酶切點選擇合成的工具酶獲得融合基因,同時掌握目的基因?qū)胧荏w細胞以及目的基因檢測與鑒定的方法等,再結合題意就能準確解答該題。

(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物,采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因,從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運肽基因。在上述引物設計時,分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列,這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個基因后,得到A、D端相連的融合基因。

(2)將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中,構建表達載體即重組質(zhì)粒并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落,再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng),可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。

(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間,此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思毎?/span>。

(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA,再依據(jù)融合基因的DNA片段設計引物進行擴增,對擴增結果進行檢測,可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄

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相關習題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】鐮刀型細胞貧血癥患者因控制血紅蛋白合成的基因發(fā)生突變,導致血紅蛋白的第六位氨基酸由谷氨酸變成纈氨酸。下列有關敘述不正確的是(  )

A. 患者細胞中攜帶谷氨酸的 tRNA與正常人相同

B. 患者紅細胞中血紅蛋白的結構與正常人不同

C. 患者血紅蛋白 mRNA的堿基序列與正常人不同

D. 患者的致病基因通過控制酶的合成控制代謝

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【題目】如圖是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)與各系統(tǒng)的功能聯(lián)系示意圖,請回答

(1)a表示____系統(tǒng),b表示____系統(tǒng),c表示____系統(tǒng),參與內(nèi)環(huán)境維持的還有圖中的________系統(tǒng)

(2)CO2不從組織液進入組織細胞的原因是________

(3)病人因呼吸受阻,肌細胞會因無氧呼吸產(chǎn)生大量乳酸,乳酸進入血液后,會使血液pH____,但乳酸可以與血液中的NaHCO3發(fā)生反應,使血液的pH維持相對穩(wěn)定。

(4)內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定,除了圖中所示的器官、系統(tǒng)的協(xié)調(diào)活動外,還必須在____的調(diào)節(jié)下進行。

(5)正常機體通過____作用,使各個____協(xié)調(diào)活動,共同維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定狀態(tài)叫做____。

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【題目】如圖表示核苷酸的模式圖,下列說法錯誤的是

A. DNA和RNA組成的不同之處表現(xiàn)在②和③上

B. 組成DNA的②是核糖

C. 病毒體內(nèi)的②只有一種,③有4種

D. 人體內(nèi)的②有兩種,③有5種

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【題目】如圖為縮手反射弧結構以及痛覺信息的流向部分示意圖,A、B為反射弧上位點。請據(jù)圖回答以下問題:

(1)刺激圖中位點A,該處細胞膜內(nèi)電位變化情況是________,這種變化主要與________離子的跨膜運輸有關,所產(chǎn)生的興奮傳遞到肌肉,致使肌肉收縮,該過程________(填“能”或“不能”)稱為反射活動。

(2)假如要通過刺激位點A和B及測量兩位點電位變化情況,驗證興奮在突觸處的傳遞的特點,請簡要說明操作流程及測量結果和結論:________。

(3)縮手反射弧的神經(jīng)中樞位于________,產(chǎn)生痛覺的神經(jīng)中樞為________。無意間,某同學被釘扎時有縮手反應,而醫(yī)生在給他打破傷風針前做皮試時,他并沒有把手縮回去,這說明縮手反射受________的調(diào)控。

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【題目】線粒體不僅是細胞的“能量工廠”,也在細胞凋亡的調(diào)控中起重要作用,如下圖所示。

(1)線粒體中的細胞色素c嵌入在線粒體內(nèi)膜的脂雙層中,參與有氧呼吸第_____階段的化學反應。

(2)當紫外線、DNA損傷、化學因素等導致細胞損傷時,線粒體外膜的通透性發(fā)生改變,細胞色素c被釋放到________中,與蛋白A結合,在ATP的作用下,使___________,引起細胞凋亡。

(3)活化的C—3酶可作用于線粒體,加速細胞色素c的釋放,從而加速細胞的凋亡,這是_______調(diào)節(jié)機制。

(4)細胞凋亡是細胞的________死亡,凋亡細胞解體后被吞噬細胞吞噬,由細胞內(nèi)的_______將其消化。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】摩爾根成功證明基因位于染色體上,下列敘述與他當時的研究過程不符合的是

A.以果蠅作為實驗材料

B.運用假說演繹法進行研究

C.他敢于懷疑,勤奮實踐

D.引用熒光標記這一新技術對基因進行定位

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【題目】圖中甲、乙為植物葉肉細胞中的兩種膜結構。下列有關敘述中,不正確的是 ( )

A. 甲、乙分別存在于葉綠體和線粒體中

B. 甲膜中的色素分子可用無水乙醇提取

C. 乙中的[H]來自葡萄糖在線粒體中的分解

D. 甲、乙上生化反應由各自不同的酶催化

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【題目】每年的8月8日是我國“全民健身日”。許多人都在自己所在的地方,快樂、健康地從事著體育健身活動。人在運動過程中(  )

A. 胰島素分泌減少,抗利尿激素分泌增多

B. 大量出汗的主要目的是排出代謝產(chǎn)物

C. 由于產(chǎn)熱大于散熱,導致體溫升高

D. 肌肉運動所需能量主要由無氧呼吸提供

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