應(yīng)用基因工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)根據(jù)資料和圖解回答下列問(wèn)題：
材料一：蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱。科學(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法——培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往會(huì)在兒童和部分成年人身上引起痛苦，將疫苗藏身于水果蔬菜中，人們?cè)谑秤眠@些轉(zhuǎn)基因植物的同時(shí)也獲得免疫力，因而無(wú)需免疫接種，這一新概念將引起疫苗研究的一場(chǎng)革命。

（1）過(guò)程①⑤所需要的工具酶有                   ，構(gòu)建的乙肝表面抗原蛋白基因表達(dá)載體一般由                                  等部分組成。
（2）過(guò)程②是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入山羊受體細(xì)胞，受體細(xì)胞應(yīng)選擇          ，采用最多的也是最有效的導(dǎo)入方法是           ；
過(guò)程⑥是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入萵苣受體細(xì)胞，受體細(xì)胞可為                 ，采用最多的導(dǎo)入方法是                 。
（3）通過(guò)①～④過(guò)程培育的蜘蛛羊可以作為乳腺生物反應(yīng)器，從         中提取所需要的蜘蛛絲蛋白。還可以形成膀胱生物反應(yīng)器，從         中提取所需蛛絲蛋白，簡(jiǎn)化提取過(guò)程。
資料三：PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（4）A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述正確的是:(    )

A．該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵；

B．該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵；

C．該過(guò)程不需要解旋酶的作用；

D．該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同；

（5）從圖中可知，催化C過(guò)程的酶是  　         ，它與正常細(xì)胞內(nèi)的酶區(qū)別是 　    ；PCR反應(yīng)除提供酶、DNA模板、通過(guò)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行外，還需要滿足的兩個(gè)基本條件是                        。
（6）如果把模板DNA的兩條鏈用¹⁵N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94℃-55℃-72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有¹⁵N標(biāo)記的DNA占     。如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對(duì)，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸                  個(gè)。

應(yīng)用基因工程技術(shù)可以獲得人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品。請(qǐng)根據(jù)資料和圖解回答下列問(wèn)題：

材料一：蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱�？茖W(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法——培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。

材料二：注射疫苗往往會(huì)在兒童和部分成年人身上引起痛苦，將疫苗藏身于水果蔬菜中，人們?cè)谑秤眠@些轉(zhuǎn)基因植物的同時(shí)也獲得免疫力，因而無(wú)需免疫接種，這一新概念將引起疫苗研究的一場(chǎng)革命。

（1）過(guò)程①⑤所需要的工具酶有                    ，構(gòu)建的乙肝表面抗原蛋白基因表達(dá)載體一般由                                   等部分組成。

（2）過(guò)程②是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入山羊受體細(xì)胞，受體細(xì)胞應(yīng)選擇           ，采用最多的也是最有效的導(dǎo)入方法是            ；

     過(guò)程⑥是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入萵苣受體細(xì)胞，受體細(xì)胞可為                  ，采用最多的導(dǎo)入方法是                  。

（3）通過(guò)①～④過(guò)程培育的蜘蛛羊可以作為乳腺生物反應(yīng)器，從          中提取所需要的蜘蛛絲蛋白。還可以形成膀胱生物反應(yīng)器，從          中提取所需蛛絲蛋白，簡(jiǎn)化提取過(guò)程。

資料三：PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，下圖表示合成過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（4）A過(guò)程高溫使DNA變性解旋，對(duì)該過(guò)程的原理敘述正確的是:(    )

A．該過(guò)程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵；

B．該過(guò)程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵；

C．該過(guò)程不需要解旋酶的作用；

D．該過(guò)程與人體細(xì)胞的過(guò)程完全相同；

（5）從圖中可知，催化C過(guò)程的酶是   　          ，它與正常細(xì)胞內(nèi)的酶區(qū)別是  　     ；PCR反應(yīng)除提供酶、DNA模板、通過(guò)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行外，還需要滿足的兩個(gè)基本條件是                         。

（6）如果把模板DNA的兩條鏈用¹⁵N標(biāo)記，游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記，控制“94℃-55℃-72℃”溫度循環(huán)3次，則在形成的子代DNA中含有¹⁵N標(biāo)記的DNA占      。如果模板DNA分子共有a個(gè)堿基對(duì)，其中含有胞嘧啶m個(gè)，則該DNA復(fù)制10次，需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸                   個(gè)。

 

研究發(fā)現(xiàn)僅在大豆葉肉細(xì)胞中存在一種多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能夠特異性地抑制部分致病真菌細(xì)胞內(nèi)的多聚半乳糖醛酸酶的活性，從而減弱病原菌對(duì)植株的侵害。研究人員成功地將PGP基因?qū)�入小麥體內(nèi)，以期獲得抗根腐病能力更高的小麥新品種。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

(1)反轉(zhuǎn)錄法是基因工程中獲得目的基因的常用方法，本研究中獲取模板RNA的大豆細(xì)胞最好取自　　　，在提取RNA過(guò)程中要特別注意防止RNA的水解，試提出一種保護(hù)措施：　　　　　　　　　　　　　　　。

(2)目的基因的擴(kuò)增常采用PCR技術(shù)，而PCR引物的設(shè)計(jì)是獲得大量高純度目的基因的關(guān)鍵。引物中堿基數(shù)量越多，則引物的特異性越　　　　。

(3)下圖是本研究使用的質(zhì)粒載體pAHC25的酶切圖譜。用限制酶Sac I和BamH I同時(shí)處理pAHC25，結(jié)果會(huì)產(chǎn)生　　　種不同的片段。在構(gòu)建含PGP基因的表達(dá)載體時(shí)，分析質(zhì)粒酶切圖譜，研究人員選擇了有單一酶切點(diǎn)的限制酶Sma I和Sac I作為本研究的工具酶，其優(yōu)點(diǎn)是　　　　　　　　　　　　　　。

(4)研究人員用基因槍法轉(zhuǎn)化該小麥的幼胚細(xì)胞，選擇幼胚細(xì)胞的原因是　　　　　　　　　　，容易誘導(dǎo)形成植株。

 

33．(8分)研究發(fā)現(xiàn)僅在大豆葉肉細(xì)胞中存在一種多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能夠特異性地抑制部分致病真菌細(xì)胞內(nèi)的多聚半乳糖醛酸酶的活性，從而減弱病原菌對(duì)植株的侵害。研究人員成功地將PGP基因?qū)�入小麥體內(nèi)，以期獲得抗根腐病能力更高的小麥新品種。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

(1)反轉(zhuǎn)錄法是基因工程中獲得目的基因的常用方法，本研究中獲取模板RNA的大豆細(xì)胞最好取自_____________，在提取RNA過(guò)程中要特別注意防止RNA的水解，試提出一種保護(hù)措施：_____________。

(2)目的基因的擴(kuò)增常采用PCR技術(shù)，而PCR引物的設(shè)計(jì)是獲得大量高純度目的基因的關(guān)鍵。引物中堿基數(shù)量越多，則引物的特異性越_____________。

(3)右圖是本研究使用的質(zhì)粒載體pAHC25的酶切圖譜。用限制酶Sac I和BamH I同時(shí)處理pAHC25，結(jié)果會(huì)產(chǎn)生_____________種不同的片段。在構(gòu)建含PGP基因的表達(dá)載體時(shí)，分析質(zhì)粒酶切圖譜，研究人員選擇了有單一酶切點(diǎn)的限制酶Sma I和Sac I作為本研究的工具酶，其優(yōu)點(diǎn)是_____________。

(4)研究人員用基因槍法轉(zhuǎn)化該小麥的幼胚細(xì)胞，選擇幼胚細(xì)胞的原因是_____________，容易誘導(dǎo)形成植株。

基因敲除是根據(jù)DNA重組原理發(fā)展起來(lái)的一門新興技術(shù)。通常用設(shè)計(jì)好的DNA片段替代動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的基因片段，從而達(dá)到基因敲除的目的。運(yùn)用基因敲除技術(shù)構(gòu)建基因敲除動(dòng)物模型是研究基因功能中較為普遍的一種方法，其基本原理如下圖所示。

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）在將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞前，需要構(gòu)建一個(gè)基因表達(dá)載體。一個(gè)理想的基因表達(dá)載體，通常由啟動(dòng)子、終止子、目的基因和            等四部分組成。在此過(guò)程中，所需使用的相關(guān)工具酶是                    。

（2）如果要獲得一只含目的基因的小鼠，則選擇的受體細(xì)胞通常為              ，基因?qū)�入該�?xì)胞時(shí)，可以采用                    等方法。

（3）上述途徑所獲得的動(dòng)物，其后代并非每一個(gè)個(gè)體都含目的基因，原因是       。

（4）假設(shè)通過(guò)基因敲除構(gòu)建了一個(gè)非球形紅細(xì)胞性貧血(Ⅱ型)模型動(dòng)物，該動(dòng)物因丙酮酸激酶缺陷或葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺陷，使紅細(xì)胞膜變化引起紅細(xì)胞自溶現(xiàn)象，但若向該動(dòng)物注射ATP后，自溶現(xiàn)象可明顯降低。由此可表明，基因?qū)ι�物性狀的控制方式之一是�?u>                    。

（5）某實(shí)驗(yàn)小組向正常小鼠胚胎細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入某“X基因”后，發(fā)現(xiàn)靶基因能正常轉(zhuǎn)錄形成mRNA,但細(xì)胞內(nèi)卻不再合成相應(yīng)蛋白質(zhì)，其原因最可能是              。