35.（7分）棉鈴蟲是一種危害棉花的害蟲。我國科學工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲致死，而這種毒蛋白對人畜無害。通過基因工程方法，科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達，棉鈴蟲吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會死亡�；ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪�用植物花粉萌發(fā)時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚細胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點是操作簡便，省去了組培的復雜過程。

（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花細胞，此過程是基因操作的基本步驟中的第三步，即                  。構(gòu)建基因表達載體時要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，其原因是                    。

（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運載體上。限制酶可以識別特定的DNA序列，并切斷         鍵。下列所示的黏性末端是由         種限制酶作用產(chǎn)生的。

（3）用標記的特異性抗體可以直接檢測毒蛋白，這種檢測方法稱為                 。

也可在宏觀性狀水平檢測該目的基因是否表達，方法是                  。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細胞表面的特異受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風險相對較小，原因是人類腸上皮細胞                 。

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質(zhì)或木栓質(zhì)來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內(nèi)的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質(zhì)抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構(gòu)造或化學物質(zhì)一直存在植物體。

傷害也可誘導植物產(chǎn)生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產(chǎn)生與草食動物消化酵素結(jié)合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結(jié)果得知，受傷的葉子會將系統(tǒng)素前驅(qū)蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統(tǒng)素（systemin），經(jīng)由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸?shù)洁徑�的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統(tǒng)素會與細胞膜的受器結(jié)合，引起細胞內(nèi)產(chǎn)生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，使整株植物產(chǎn)生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關(guān)蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）

A 植物體受傷時，會誘導系統(tǒng)素的產(chǎn)生

B 系統(tǒng)素與茉莉酸結(jié)合而活化防御機制

C 系統(tǒng)素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株

D 系統(tǒng)素將訊息直接傳遞給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，并令其產(chǎn)生蛋白質(zhì)抑制劑

E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內(nèi)的特定基因，并進而在細胞質(zhì)內(nèi)制造蛋白

酶抑制劑

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質(zhì)或木栓質(zhì)來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內(nèi)的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質(zhì)抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構(gòu)造或化學物質(zhì)一直存在植物體。

傷害也可誘導植物產(chǎn)生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產(chǎn)生與草食動物消化酵素結(jié)合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結(jié)果得知，受傷的葉子會將系統(tǒng)素前驅(qū)蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統(tǒng)素（systemin），經(jīng)由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸?shù)洁徑�的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統(tǒng)素會與細胞膜的受器結(jié)合，引起細胞內(nèi)產(chǎn)生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，使整株植物產(chǎn)生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關(guān)蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）

A 植物體受傷時，會誘導系統(tǒng)素的產(chǎn)生

B 系統(tǒng)素與茉莉酸結(jié)合而活化防御機制

C 系統(tǒng)素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株

D 系統(tǒng)素將訊息直接傳遞給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，并令其產(chǎn)生蛋白質(zhì)抑制劑

E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內(nèi)的特定基因，并進而在細胞質(zhì)內(nèi)制造蛋白

酶抑制劑

植物雖不能動，但卻具有某些防御機制以對抗外界的傷害，如利用體表的毛、刺、幾丁質(zhì)或木栓質(zhì)來保護植株本身免于受傷害；也會利用囊泡內(nèi)的次級代謝物（如植物堿和單寧酸等）來防御掠食者；更會分泌化學物質(zhì)抑制別種植物的種子萌芽或生長，以降低資源競爭。有些植物的次級代謝物可用于制藥，如奎寧（quinine）。無論草食動物或侵略者是否存在，這些防御構(gòu)造或化學物質(zhì)一直存在植物體。
傷害也可誘導植物產(chǎn)生防御機制，如葉片被寄生蜂咬傷時，植物會快速產(chǎn)生與草食動物消化酵素結(jié)合的蛋白酶抑制劑。從蕃茄的實驗結(jié)果得知，受傷的葉子會將系統(tǒng)素前驅(qū)蛋白切割出由18個胺基酸組成的系統(tǒng)素（systemin），經(jīng)由受傷組織的細胞壁或細胞間隙運輸?shù)洁徑�的韌皮部，再傳送到整個植物體。系統(tǒng)素會與細胞膜的受器結(jié)合，引起細胞內(nèi)產(chǎn)生茉莉酸（jasmonic acid），并傳訊給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，使整株植物產(chǎn)生蛋白酶抑制劑，達到防御的效果。下列有關(guān)蕃茄誘導防御機制之敘述，哪些正確？（應選三項）
A 植物體受傷時，會誘導系統(tǒng)素的產(chǎn)生
B 系統(tǒng)素與茉莉酸結(jié)合而活化防御機制
C 系統(tǒng)素在細胞壁和細胞間隙移動，進入韌皮部而傳遍全株
D 系統(tǒng)素將訊息直接傳遞給細胞核內(nèi)相關(guān)的基因，并令其產(chǎn)生蛋白質(zhì)抑制劑
E 茉莉酸將訊息傳遞給細胞核內(nèi)的特定基因，并進而在細胞質(zhì)內(nèi)制造蛋白
酶抑制劑