（17分）基因工程又叫基因拼接技術(shù)。

（1）在基因工程技術(shù)中，用人工合成方法獲得目的基因的途徑之一是：以目的基因轉(zhuǎn)錄的       為模板，   　   成互補的單鏈DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

（2）基因工中常用的受體細(xì)胞有細(xì)菌、真菌、  　　　　  。

（3）在基因工程技術(shù)中，DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：  　　　　 和   　　　 。

（4）大腸桿菌質(zhì)粒經(jīng)EcoRI（一種限制性核酸內(nèi)切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，則EcoRI的識別序列和切點是_____________________（切點用箭頭標(biāo)在序列上）。

（5）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，約80%的轉(zhuǎn)基因植物都是通過這種方法獲得。除此法之外，還有____________和____________等。

（6）聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR技術(shù)）是在實驗室中以少量樣品DNA制備大量DNA的生化技術(shù).某個DNA樣品有1000個脫氧核苷酸，已知它的一條單鏈上堿基A:G:T:C=1:2:3:4，則經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生     個DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是           個。請指出PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)錄過程的二個不同之處：

①                                                                  。

②                                                                  。

（7）一個基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因之外，還必須有      ，       以

及             。[來源:學(xué)#科#網(wǎng)Z#X#X#K]

（8）在目的基因的監(jiān)測與鑒定工作中，又是需監(jiān)測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，監(jiān)測的方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行             雜交，若有           出現(xiàn)，表面目的基因已經(jīng)形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。

控制哺乳動物的性別對于畜牧業(yè)生產(chǎn)有著十分重要的意義。目前，分離精子技術(shù)是有效的性別控制方法。例如：牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右，利用這一差異人們借助特殊儀器將它們分離開來，再通過胚胎工程技術(shù)就可培育出所需性別的試管牛（如下圖所示）。

根據(jù)以上信息回答下列相關(guān)問題：

（1）圖中過程①通常采用的是__________技術(shù)，在這個過程中_________的精子與卵細(xì)胞結(jié)合形成受精卵。為獲得更多的卵細(xì)胞需要給良種母牛注射適宜劑量的__________。

（2）過程②中受精卵培養(yǎng)發(fā)育至________時期，再經(jīng)胚胎移植到代孕母牛，從而獲得后代。若希望同時獲得多個性狀相同的個體，可以使用__________技術(shù)。

（3）動物“生物反應(yīng)器”是轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)中最誘人的部分之一。為了提高牛奶中賴氨酸的含量，某大學(xué)研究人員利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，得到了一頭轉(zhuǎn)入外源賴氨酸基因的克隆奶牛，預(yù)計將來其分泌的乳汁中含有更多的賴氨酸。下圖為培育轉(zhuǎn)基因克隆動物的技術(shù)流程圖，獲得外源賴氨酸基因所需要的工具酶是__________。該基因不能從人體細(xì)胞中獲得，原因是____________________。

已知該奶牛培育過程中所用受體細(xì)胞為一只雌性奶牛胎兒的成纖維細(xì)胞，導(dǎo)入目的基因常用的方法是_________________，把該含有外源基因的受體細(xì)胞培育成為一頭奶牛還需要用到的技術(shù)有____________________（至少寫出兩種）。

（15分）請回答下列有關(guān)生物工程的問題：

（1）對于基因工程來說，其核心步驟是                ，若要培育能從乳汁中分泌人的干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，需要選擇的受體細(xì)胞是____________(受精卵、乳腺細(xì)胞)，導(dǎo)入該細(xì)胞最有效的方法是                。為了讓轉(zhuǎn)入的干擾素基因高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的             和             之間。

（2）植物體細(xì)胞雜交過程中，在把植物細(xì)胞雜交之前，必須用____________去除細(xì)胞壁，雜交過程的另一個環(huán)節(jié)是__________________；培育出諸如“番茄—馬鈴薯”這樣的雜種植株利用了植物細(xì)胞全能性的原理。胚胎干細(xì)胞也有類似的特性，并且胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生        。

（3）在進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細(xì)胞進(jìn)行融合，這兩種細(xì)胞一種是在體外能夠大量增殖的             ，另外一種是已免疫的B細(xì)胞；誘導(dǎo)該兩種細(xì)胞融合常用的因素有PEG、        、滅活病毒等。體外培養(yǎng)的過程中，貼壁生長的細(xì)胞會出現(xiàn)_________現(xiàn)象。

（4）在“試管�！钡呐嘤�過程中，要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合，需要對精子進(jìn)行處理，使其             。另外，培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至                             期，為使雌性個體一次排出多枚卵母細(xì)胞，常采用             激素進(jìn)行處理。

（5）“桑基魚塘”生態(tài)系統(tǒng)能充分利用廢棄物中的能量，形成“無廢棄物農(nóng)業(yè)”，這主要是遵循生態(tài)工程的             原理。

【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）   。
（1）對于基因工程來說，其核心是                               ；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是                      。
（2）植物體細(xì)胞雜交過程有兩個關(guān)鍵，一個是在把植物細(xì)胞雜交之前，必須               
                   ；另外一個是                                 。
（3）在進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細(xì)胞進(jìn)行融合，一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞，另外一種是                      ；誘導(dǎo)該兩種細(xì)胞融合常用的因素有PEG、電激、                    等。
（4）胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的              性，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生           。
（5）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。
①進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。
②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反應(yīng)過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是                                              。
利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）   。

（1）對于基因工程來說，其核心是                               ；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是                      。

（2）植物體細(xì)胞雜交過程有兩個關(guān)鍵，一個是在把植物細(xì)胞雜交之前，必須               

                   ；另外一個是                                 。

（3）在進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)過程中，要把兩種細(xì)胞進(jìn)行融合，一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞，另外一種是                      ；誘導(dǎo)該兩種細(xì)胞融合常用的因素有PEG、電激、                    等。

（4）胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的              性，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生           。

（5）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。

①進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用___________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細(xì)胞。

②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。

③采用PCR技術(shù)可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反應(yīng)過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是                                              。

利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。