Question

7．關于凝膠色譜柱的裝填，除哪項外均為正確解釋（　�。�

• A． 交聯(lián)葡聚糖凝膠（G-75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值
• B． 凝膠用自來水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液
• C． 用300ml的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12h
• D． 色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝

Answer 1

分析 凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離．
裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，因為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果．

解答 解：A、交聯(lián)葡聚糖凝膠（Sephadex G-75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5克，A正確；
B、在配制凝膠懸浮液時，凝膠應用蒸餾水充分溶脹，B錯誤；
C、裝填完后，需用300 mL的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH=7.0）充分洗滌平衡凝膠12小時，使凝膠裝填緊密，C正確；
D、色譜柱內(nèi)不能有氣泡，一旦發(fā)現(xiàn)氣泡，必須重裝，D正確．
故選：B．

點評 本題考查了生物技術與實踐的相關實驗，意在考查學生是理解和應用能力，對色譜柱裝填的方法及蛋白質(zhì)分離方法的記憶和綜合應用是本題考查的重點．