Question

（14分）胰島B細胞移植是一種有效治療糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE)可定向誘導人羊膜間充質干細胞（hAMSCs)分化成胰島B細胞。請回答下列問題：

（1)取人羊膜組織刮除血塊、上皮細胞，沖洗后剪碎，然后用 酶處理，最終制成hAMSCs懸液。將細胞懸液放人培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)，當細胞貼壁生長到一定階段時，出現(xiàn) 現(xiàn)象，此時細胞停止分裂增殖，這時需要將細胞進行相關處理，然后進行傳代培養(yǎng)。

（2）取傳至第3代的hAMSCs放入細胞培養(yǎng)板，同時加入RPE進行誘導分化培養(yǎng)。該代hAMSCs能保持細正常的 。誘導分化培養(yǎng)15天后，提取細胞的 ，用胰島素基因探針進行分子雜交，可初步檢測hAMSCs是否分化成胰島B細胞。

（3）用人的雜交瘤細胞來生產人源單克隆抗體難以成功，因此單克隆抗體大都來自鼠源。但鼠源單抗在人體內使用時，會產生較強的免疫原性，為解決這一問題，發(fā)明了嵌合抗體。大致過程如下圖所示：

嵌合抗體能降低鼠源抗體的免疫原性，從上圖中可以推測，免疫原性的產生主要與抗體的 （選填“v區(qū) "、“c區(qū) "）有關。嵌合抗體的生產屬于 工程范疇。

（4）科學家們用細胞融合實驗證明，分化的細胞中存在“閑置不用 " 的結構基因。他們把大鼠肝腫瘤細胞和小鼠成纖維細胞融合成雜交瘤細胞，篩選出含有兩套肝細胞染色體和一套成纖維細胞染色體的細胞。這些細胞既保持了合成大鼠肝細胞 3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠肝細胞這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細胞中從不合成這些。由此可見，融合實驗證明了小鼠成纖維細胞 。

Answer 1

（1）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 接觸抑制 （2）（二倍體）核型 RNA（或mRNA）

（3）C區(qū) 蛋白質（4）含有不表達的但肝細胞專一表達的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達

【解析】

試題分析：（1）動物細胞培養(yǎng)前，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織獲取細胞懸液；當細胞貼壁生長出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象時，細胞停止分裂增殖。

（2）動物細胞培養(yǎng)時，10代以內的細胞能保持正常的二倍體核型。提取細胞的mRNA，用胰島素基因探針進行分子雜交，可初步檢測hAMSCs基因是否表達，即是否分化成胰島B細胞。

（3）從上圖可以看出，免疫原性的產生主要與抗體的C區(qū)有關。嵌合抗體的生產屬于蛋白質工程。

（4）由題意可知，含有兩套肝細胞染色體和一套成纖維細胞染色體的細胞，既保持了合成大鼠肝細胞 3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠肝細胞這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細胞中從不合成這些。由此可見，小鼠成纖維細胞含有不表達的但在肝細胞中可專一表達的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達。

考點：本題考查動物細胞培養(yǎng)、嵌合抗體、細胞融合等知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理判斷或得出正確結論的能力。